锌指蛋白A20介导锌缓解鸡肠上皮细胞炎症反应的机制

• 作者: 呙于明 张贝贝 李昌武 聂伟 袁建敏 郭双双 高金鑫
• 来源期刊: 动物营养学报
• 学科: 农学
• 关键词: 肉鸡 原代肠上皮细胞 锌 A20 siRNA 腺病毒
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 分子营养
• 页码范围: 2254-2266
• 页数: 13页
• 分类号: S831
• 字数: 6792字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2019.05.032

摘要

本研究通过对鸡肠上皮细胞感染锌指蛋白A20基因siRNA病毒和A20基因腺病毒,探究锌与A20基因对缓解脂多糖(LPS)诱导的鸡肠上皮细胞炎症反应的作用.结果 表明:LPS可显著上调鸡肠上皮细胞促炎因子白细胞介素(IL)-1β和IL-8的基因表达水平(P＜0.05),作用的最佳剂量和时间分别是10 ng/mL和6h.体外添加25 μmol/L锌可显著缓解LPS诱导的鸡肠上皮细胞IL-8、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达水平和蛋白产量的提高以及Toll样受体4(TLR4)的转录激活.肠上皮细胞感染A20基因siRNA病毒后,A20的蛋白产量显著下调(P＜0.05),IL-1β、IL-8和TNF-α的基因表达水平和蛋白产量显著升高(P＜0.05),同时加剧LPS诱导的IL-8、IL-1β基因表达水平和IL-1β、TNF-α蛋白产量的提高(P＜0.05).相对于对照组,加锌可促进胞浆中A20和核因子-KB (NF-KB) p65的蛋白表达,并下调磷酸化NF-κB p65的蛋白表达;在进行A20基因沉默后,导致胞浆中A20、NF-KB p65蛋白表达下调和磷酸化NF-κB p65、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(IκBα)蛋白表达上调以及胞核中磷酸化NF-κB p65的蛋白表达升高,而加锌并不能改善.与感染空白腺病毒组相比,肠上皮细胞感染A20腺病毒可极显著提高A20的基因表达水平(P＜0.01),并极显著降低IL-1β、IL-8的基因表达水平(P＜0.01),且可极显著降低添加LPS导致的IL-1β、IL-8和TLR4基因表达水平的上升(P＜O.O1).锌添加可显著降低IL-1β的基因表达水平,显著提高NF-κB p65的基因表达水平(P＜0.05).综上所述,锌可通过A20-NF-κB p65信号通路缓解LPS诱导的鸡肠上皮细胞炎症反应.