PK-15细胞微载体悬浮培养及PCV2增殖工艺研究

• 作者: 乔健 易小萍 李亚杰 杨保收 梁武
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: PK15细胞 猪圆环病毒2型 微载体 悬浮培养
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 兽医药械
• 页码范围: 103-106,110
• 页数: 5页
• 分类号: S852.612
• 语种: 中文

摘要

研究表明,PCV2仅在PK15等少数哺乳动物细胞上增殖,但由于PCV2毒力弱,且不产生细胞病变,获得高滴度病毒难度较大[1].因此,PCV2的培养滴度高低已成为制约现有疫苗质量的关键瓶颈之一.为建立在生物反应器内微载体逐级放大培养PK-15细胞和增殖PCV2技术,本研究以德国Sartorius14 L生物反应器微载体悬浮培养PK-15细胞,对PK-15细胞初始接种密度、搅拌转速、微载体浓度、PCV2接毒时间、接毒剂量、收毒时间等工艺参数进行了摸索和优化[2-3].结果 表明:3 g/L的微载体和60 r/min的搅拌转速下,采用0.5×106cells/mL的初始接种密度操作工艺可获得最佳PK-15细胞生长效能.细胞生长后6h接毒,采用感染复数(MOI)为0.5的接毒比例,细胞接毒后在微载体上生长96 h可获得最高的PCV2增殖滴度108.5 TCID50/mL,利用该工艺,经过消化转移将PK-15细胞从14 L反应器放大至42 L反应器,微载体上细胞贴附均匀、生长旺盛,42 L反应器中培养72 h细胞密度可达39.0×105 cells/mL,病毒滴度108.3TCID50/mL,应用生物反应器培养PCV2滴度较常规转瓶培养工艺提高了近10倍.进一步表明PCV2悬浮培养放大与接毒工艺稳定,为下一步实现工业级规模化生产奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	乔健	中国农业大学动物医学院	113	566	13.0	18.0
2	易小萍	华东理工大学生物反应器国家重点实验室	21	62	5.0	6.0