鸟苷酸交换因子P92GEF通过靶向调控RhoA抑制肿瘤细胞增殖侵袭

• 作者: 唐秋琳 李黎博 毕锋 石芳 郎楠
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 鸟苷酸交换因子 P92GEF Dbl家族 Rho家族 癌基因
• 年，卷（期）: 2019,（16）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3018-3027
• 页数: 10页
• 分类号: R730.231
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2019.16.004

摘要

Dbl家族鸟苷交换因子(GEFs)是Rho家族蛋白发生恶性转化的主要调控单位,它通过使Rho蛋白从无活性的GDP形式转换为GTP形式的Rho蛋白而发挥作用,参与细胞骨架重排,细胞的生长和活力.P92GEF是一GEFs家族分子.本研究通过Real time PCR对P92GEF在人体48种正常组织中的表达情况进行了测定;GST-pulldown技术对P92GEF的体内GEF活性进行了检测;双荧光素酶报告基因检测技术对下游小分子进行转录因子活性检测;应用免疫荧光双染标记法完成了高表达P92GEF对正常细胞骨架形态的影响;在细胞表型实验中分别使用CCK8法、Transwell法及软琼脂克隆形成实验检测了高表达P92GEF对细胞增殖侵袭迁移及体外成瘤能力的影响.研究结果显示P92GEF有841个氨基酸,具有典型的Dbl家族分子结构域,在肺组织中表达量最高,能够促使正常成纤维细胞中的应力纤维(stress fiber)增多,P92GEF转染的NIH3T3细胞可以独立生长和形成继发性病灶,同时促使细胞增殖,侵袭及克隆形成能力增强,体外转录因子活性检测发现该基因可能与JAK/STAT通路有关.因此,P92GEF是一个典型的鸟苷交换因子家族分子,能激活Rho家族分子RhoA,具有明显的癌基因特征.