肌钙蛋白Ⅰ3基因表达下调对大鼠胚胎心肌细胞H9C2生物学特性的影响

• 作者: 刘红波 姜红堃 张璐璐 邱广蓉 郑春杨
• 来源期刊: 中华实用儿科临床杂志
• 关键词: 肌钙蛋白Ⅰ3基因 细胞凋亡 细胞增殖 细胞周期
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 698-702
• 页数: 5页
• 字数: 4791字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-428X.2019.09.014

摘要

目的 探讨肌钙蛋白Ⅰ3(Tnni3)基因表达下调对大鼠胚胎心肌细胞H9C2生物学特性的影响.方法 培养大鼠胚胎心肌细胞H9C2,分为2组:转染阴性对照小干扰RNA (NC-siRNA)组和转染Tnni3小干扰RNA (Tnni3-siRNA)组.分别于转染后48 h、72 h收集细胞,实时定量PCR检测Tnni3 mRNA和Caspase-3 mRNA表达,Western blot检测Trmi3蛋白、Cyclin A1蛋白和Cyclin B1蛋白表达,Annexin V-异硫氰酸荧光素(FITC)凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 与转染NC-si-RNA组比较,转染Tnni3-siRNA 48 h,Tnni3基因mRNA(0.27 ±0.05比1.00±0.00)和蛋白(0.18 _±0.03比1.00±0.00)表达降低,差异均有统计学意义(t=25.26、47.40,均P＜0.01).转染NC-siRNA组和转染Tnni3-siRNA组H9 C2细胞均出现细胞凋亡.与转染NC-siRNA组比较,转染Tnni3-siRNA 72 h,H9C2细胞凋亡率明显增高[(11.30±1.85)％比(0.33±0.15)％],Caspase-3基因mRNA表达升高(1.39 ±0.13比1.00±0.00),差异均有统计学意义(t=10.24、5.19,均P＜0.01).与转染NC-siRNA组比较,转染Tnni3-siRNA组表现为显著的时间依赖性细胞增殖能力降低(48 h:0.32 ±0.06比0.46 ±0.03;72 h:0.31±0.01比0.63±0.04;96 h:0.36±0.01比0.75±0.04),差异均有统计学意义(t=3.62、13.45、16.39,均P＜0.05).转染Tnni3-siRNA 72 h,G1期、S期和G2期细胞比例分别为(71.25±3.82)％、(18.28±2.78)％和(9.94±1.09)％.与转染NC-siRNA组比较,转染Tnni3-siRNA组G2期细胞比例明显增加[(9.94±1.09)％比(4.54±0.99)％],Cyclin A1蛋白表达升高(1.89±0.09比1.00±0.00),Cyclin B1蛋白表达降低(0.47±0.06比1.00 ±0.00),差异均有统计学意义(t=6.35、17.12、15.32,均P＜0.01).结论 Tnni3基因表达下调能够诱导大鼠胚胎心肌细胞H9C2细胞凋亡,抑制细胞增殖,导致细胞周期阻滞于G2期.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜红堃	中国医科大学附属第一医院儿科	55	140	6.0	8.0
2	刘红波	中国医科大学公共卫生学院卫生统计学教研室	43	493	12.0	21.0
3	邱广蓉	中国医科大学生命科学学院医学遗传学教研室	34	176	8.0	12.0
4	张璐璐	中国医科大学生命科学学院医学遗传学教研室	6	20	4.0	4.0
5	郑春杨	中国医科大学生命科学学院医学遗传学教研室	1	0	0.0	0.0