人GINS2基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其在上皮性卵巢癌中的表达

• 作者: 严婷 叶艾竹 江恩利 王玉娟
• 来源期刊: 贵州医药
• 学科: 医学
• 关键词: 上皮性卵巢癌 GINS2 RNA干扰 慢病毒
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 679-682,封3
• 页数: 5页
• 分类号: R737.31
• 字数: 4199字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人GINS2基因RNA干扰慢病毒表达载体,并建立稳定干扰GINS2基因表达的上皮性卵巢癌细胞系,为研究GINS2蛋白在上皮性卵巢癌发生发展中的作用奠定基础.方法 针对GINS2基因序列,按照RNAi序列的设计原则,设计、合成GINS2基因特异性小分子干扰siRNA(small interference RNA,siRNA)靶点,与慢病毒构建重组形成shRNA表达载体,利用PCR和测序鉴定获取正确克隆.将筛选出的最有效重组载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞并测定病毒滴度.随后将其感染上皮性卵巢癌SKOV3细胞株细胞,采用Real-time PCR检测靶基因的沉默效率.结果 慢病毒RNA干扰载体经酶切和测序鉴定证实准确连接测序正确,且包装出来的病毒纯化后滴度达5×108 TU/mL.RT-qPCR、Western blot结果显示感染后GINS2 mRNA及蛋白水平显著下降.结论 成功构建了人GINS2基因特异性的慢病毒干扰载体,并获得了GINS2基因稳定干扰的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严婷	贵州省人民医院妇科	13	25	4.0	4.0
2	王玉娟	贵州省人民医院妇科	20	74	5.0	8.0
3	叶艾竹	贵州省人民医院检验科	17	40	4.0	5.0
4	江恩利	贵州省人民医院妇科	12	24	3.0	4.0