WWOX基因慢病毒载体的构建及其在卵巢癌细胞中的表达

• 作者: 宋红林 张洁清 李力 林小钰 王桂玲
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: WWOX 慢病毒载体 卵巢癌
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 338-341
• 分类号: R737.31
• 字数: 3243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2011.03.004

摘要

目的:构建及鉴定WWOX基因慢病毒载体,观察WWOX基因在人卵巢癌PEO1细胞株中的表达,为进一步研究WWOX基因的作用机制及其功能奠定基础.方法:采用PCR技术从克隆质粒模板中获得全长WWOX基因,将WWOX基因 亚克隆到慢病毒载体PCDH-CMV-MCS-EFl-copGFP中,构建慢病毒载体表达质粒PCDH-WWOX,通过双酶切验证后,慢病毒表达质粒与慢病毒包装质粒pPACKHl-GAG,pPACKH1-REV,Pvsv-G共转染293T细胞,获得携带WWOX基因及EGFP基因的重组慢病毒Lenti WWOX,并转染靶细胞人卵巢癌PEO1细胞株.通过RT-PCR和Western Blot验证Lenti WWOX在PEO1细胞株中的表达.结果:测序结果显示成功构建重组慢病毒载体表达质粒PCDH-WWOX;表达质粒与辅助包装质粒共转染包装细胞293T后能产生慢病毒颗粒并能有效感染靶细胞PEO1,转导效率约为60%,有WWOX基因mRNA和蛋白水平的高表达.结论:本实验成功构建了携带WWOX基因慢病毒表达载体,包装成病毒后能有效感染卵巢癌PEO1细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张洁清	广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科	88	432	12.0	17.0
2	李力	广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科	377	1810	20.0	26.0
3	宋红林	广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科	34	185	9.0	12.0
4	林小钰	广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科	2	7	1.0	2.0
5	王桂玲	广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科	3	1	1.0	1.0