大豆球蛋白通过 p38丝裂原活化蛋白激酶/c﹣Jun氨基端激酶信号通路引起猪小肠上皮细胞损伤

• 作者: 冯士彬 吴金节 夏晓冬 张瑜 彭成璐 李玉 李锦春 王希春 舒迎霜 贺濛初
• 来源期刊: 动物营养学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆球蛋白 猪小肠上皮细胞 c﹣Jun氨基端激酶 p38
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 分子营养
• 页码范围: 1718-1724
• 页数: 7页
• 分类号: S828
• 字数: 4913字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2019.04.029

摘要

通过体外培养猪小肠上皮细胞( IPEC﹣J2) ,研究不同浓度大豆球蛋白(11S)对猪小肠上皮细胞的影响.试验分为6组:A、B、C、D、E、F组,其中A组为对照组,其余各组分别在培养液中添加1、5、10、5、5 mg/mL 的 11S,并且在 E、F 组分别添加 1 μmol/L 的 c﹣Jun 氨基端激酶( JNK)和 p38 抑制剂.培养 24 h 后,用 CCK﹣8 法检测细胞存活率;用酶联免疫吸附测定( ELISA)法检测细胞一氧化氮( NO) 、 5-羟色胺( 5﹣HT ) 、白细胞介素-6 ( IL﹣6)和白细胞介素-10( IL﹣10)含量;Western blot检测细胞磷酸化JNK( p﹣JNK) 、磷酸化p38( p﹣p38)和B淋巴细胞瘤-2( Bcl﹣2)蛋白表达量;实时荧光定量PCR( qRT﹣PCR)检测细胞Bcl﹣2/Bcl﹣xL相关凋亡蛋白( Bad) 、Bcl﹣2相关X蛋白( Bax) 、Bcl﹣2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3( caspase﹣3) mRNA相对表达量.结果表明:1)与A组相比,C、D组细胞存活率极显著降低( P＜0.01);E、F组细胞存活率显著或极显著高于C组( P＜0.05或P＜0.01) . 2)与A组相比,C、D组NO、5﹣HT、IL﹣6、IL﹣10含量均极显著增加(P＜0.01) ;与C组相比,E、F组NO、5﹣HT、IL﹣6、IL﹣10含量显著或极显著降低( P＜0.05或P＜0.01). 3)与A组相比,C、D组p﹣JNK、p﹣p38 蛋白表达量显著或极显著增加( P＜0.05 或 P＜0. 05) ,C、D 组 Bcl﹣2蛋白表达量极显著降低( P＜0. 01) ;与 C 组相比, E、F 组p﹣JNK、p﹣p38蛋白表达量显著或极显著降低( P＜0.05或P＜0.01) ,E、F组Bcl﹣2蛋白表达量显著或极显著增加( P＜0.05或 P＜0.01) . 4)与 A 组相比,B、C 和 D 组 Bcl﹣2/Bax极显著降低( P＜0.01) ,C、D组Bax/Bcl﹣xL、Bad和caspase﹣3 mRNA相对表达量显著或极显著增加( P＜0. 05 或P＜0.01) ;与C组相比,E、F组Bcl﹣2/Bax极显著增加( P＜0.01) ,E、F组Bax/Bcl﹣xL和caspase﹣3 mRNA相对表达量极显著降低( P＜0.01) ,F组Bad mRNA相对表达量极显著降低( P＜0.01) .结果说明,11S通过p38 MAPK/JNK信号通路引起猪小肠上皮细胞损伤.