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基于HepaRG活细胞的N-乙酰基转移酶1活性测定方法的建立与评价
基于HepaRG活细胞的N-乙酰基转移酶1活性测定方法的建立与评价
作者:
刘亚琦
宋佩佩
寇佳昕
王璨
秦红岩
袁圆
魏玉辉
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
4-氨基水杨酸
HepaRG细胞系
N-乙酰基转移酶1
酶活性测定
摘要:
目的 建立基于人类肝癌HepaRG活细胞的N-乙酰基转移酶1(NAT1)活性测定方法,并对其测定结果 进行评价.方法 HepaRG细胞用含10%牛血清和青、链霉素培养液进行培养.用免疫印迹技术考察培养24,48和72 h的HepaRG细胞中NAT1表达情况;用噻唑蓝实验测定NAT1底物4-氨基水杨酸(4-ASA)孵育24和48 h对细胞活力的影响,分别用液-质联用技术及免疫印迹技术考察不同浓度4-ASA对HepaRG细胞中NAT1活性及蛋白表达的影响,比较基于HepaRG活细胞的NAT1活性测定方法与传统组织/细胞裂解法对NAT1活性测定结果的影响.结果 与培养24 h的HepaRG细胞相比(0.71±4.00×10-3),培养48和72 h的HepaRG细胞中NAT1的表达量显著增加,分别为(0.80±7.00×10-3)和(1.04±0.04),差异均有统计学意义(均P<0.05).与对照组相比,浓度为5~100μmol· L-1的4-ASA孵育HepaRG细胞24和48 h,对其活力无明显影响(均P>0.05);25~100 μmol·L-1的4-ASA孵育HepaRG细胞8h,对NAT1蛋白表达无明显影响(均P>0.05),且50~ 75 μmol·L-1的4-ASA孵育HepaRG细胞,培养液中4-ASA代谢物的生成量与底物浓度成正比.NAT1活性测定结果显示,HepaRG活细胞法测得的结果略低于传统的组织/细胞裂解法所测得的结果(P <0.05或P<0.01),但两者的酶促反应趋势比较相似.结论 以4-ASA为反应底物建立的基于HepaRG活细胞的NAT1活性测定方法具有操作简单、结果稳定、可动态检测等优势,有望用于NAT1活性的动态测定及NAT1特异性抑制的高通量筛选.
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文献信息
篇名
基于HepaRG活细胞的N-乙酰基转移酶1活性测定方法的建立与评价
来源期刊
中国临床药理学杂志
学科
医学
关键词
4-氨基水杨酸
HepaRG细胞系
N-乙酰基转移酶1
酶活性测定
年,卷(期)
2019,(4)
所属期刊栏目
研究方法
研究方向
页码范围
392-395
页数
4页
分类号
R97
字数
2692字
语种
中文
DOI
10.13699/j.cnki.1001-6821.2019.04.021
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
魏玉辉
兰州大学第一医院药剂科
99
621
14.0
20.0
2
秦红岩
兰州大学第一医院药剂科
26
142
7.0
11.0
3
寇佳昕
兰州大学第二临床医学院呼吸科
2
0
0.0
0.0
4
宋佩佩
兰州大学第二临床医学院呼吸科
1
0
0.0
0.0
5
刘亚琦
兰州大学第一临床医学院麻醉科
1
0
0.0
0.0
6
袁圆
兰州大学第一临床医学院麻醉科
1
0
0.0
0.0
7
王璨
兰州大学第二临床医学院呼吸科
1
0
0.0
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二级参考文献(0)
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引证文献(0)
二级引证文献(0)
研究主题发展历程
节点文献
4-氨基水杨酸
HepaRG细胞系
N-乙酰基转移酶1
酶活性测定
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国临床药理学杂志
主办单位:
中国药学会
出版周期:
半月刊
ISSN:
1001-6821
CN:
11-2220/R
开本:
大16开
出版地:
北京市海淀区学院路38号
邮发代号:
82-142
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
8140
总下载数(次)
20
总被引数(次)
55066
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