摘要:
目的 探讨异烟肼(INH)致人肝细胞损伤中微小RNA155(miR-155)调控核转录因子κB(NF-κB)信号通路的作用机制.方法 培养人正常肝细胞HL-7702,加入INH成功建立肝细胞损伤模型后,向细胞内转染小干扰RNA(miR-155 mimics与miR-155 inhibitor).实验分为6组:对照组、模型组、过表达组(INH +miR-155 mimics)、mimics阴性对照组(mimics阴性对照)、敲减组(INH+miR-155 inhibitor)、inhibitor阴性对照组(inhibitor阴性对照).赖氏法检测各组细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测肝细胞中miR-155、NF-κB、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的mRNA表达水平.结果 对照组,模型组,过表达组,mimics阴性对照组,敲减组,inhibitor阴性对照组的ALT分别为(3.60±0.48),(9.63±0.27),(15.54±0.35),(3.95±0.69),(7.63±0.36),(4.33±0.19)U·L-1;AST分别为(6.97±0.18),(13.59 ±0.22),(18.53 ±0.26),(6.94 ±0.23),(10.79±0.20),(6.92±0.20)U·L-1;NF-κB mRNA分别为0.99±0.02,2.47±0.04,3.16±0.05,0.98±0.05,1.64±0.06,0.99±0.02;TNF-α mRNA分别为0.97±0.02,2.56±0.12,3.24±0.06,1.03±0.02,1.70±0.03,0.97±0.02;IL-6 mRNA分别为1.06±0.02,2.12±0.06,2.91±0.07,1.04±0.04,1.66±0.12,0.94±0.03,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 通过敲减miR-155可降低NF-κB的表达,从而减轻INH致人肝细胞损伤.