半巢式RT-Realtime PCR方法检测藜草花叶病毒

• 作者: 刘宁 厉艳 封立平 李金庆 段效辉 王颖 粟智平 贺丽娜 鲁闽
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 藜草花叶病毒 半巢式实时荧光PCR 检测
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 贮运加工·检测分析
• 页码范围: 194-196
• 页数: 3页
• 分类号: S412
• 字数: 3273字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2019.02.060

摘要

[目的]根据藜草花叶病毒 (SoMV) 全基因组中多聚蛋白质基因序列保守区, 分别设计2套TaqMAN探针和引物, 建立半巢式实时荧光PCR检测SoMV的新方法.[方法]提取病毒核酸进行反转录操作合成cDNA, 依据设计好的2套TaqMAN探针和引物, 分别进行实时荧光PCR特异性与灵敏度检测, 并进行2套引物探针的扩增效率对比试验.[结果]方法特异性强, 灵敏度高达0.4 fg/μL植物总RNA, 2套引物探针的扩增效率试验对比结果显示扩增效率几乎完全一样.[结论]该方法适用于藜草花叶病毒的检疫鉴定.