嵌合新抗原Adpgk的乙肝病毒核心抗原病毒样颗粒的构建及表达

• 作者: 杨怡姝 盛望 赵振伯 马洪涛
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 结肠癌 新抗原 乙肝病毒核心抗原 原核表达
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4741字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2020.01.001

摘要

目的:制备嵌合结肠癌新抗原Adpgk的乙肝病毒核心抗原(HBcAg)病毒样颗粒(VLP).方法:通过重叠PCR将新抗原编码序列插入截短型HBcAg(1～149 aa)第78、79位氨基酸编码序列之间,并将融合基因克隆至原核表达载体pET-22b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,利用亲和层析与超滤管纯化浓缩目的蛋白,通过Western印迹、粒径分析与透射电镜成像鉴定嵌合病毒样颗粒.结果:构建了pET-22b(+)重组表达载体并转入大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE结果显示在30℃经1 mmol/L IPTG诱导5 h即可获得高浓度的可溶性蛋白,通过亲和层析与超滤浓缩得到了纯度良好的目的蛋白;Western印迹结果表明连有His标签的目的蛋白获得表达且浓度较高;透射电镜成像可见密集的大小均一、空心的球形病毒样颗粒结构.结论:制备出浓度与纯度良好且组装正确的嵌合HBcAg VLP.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨怡姝	北京工业大学生命科学与生物工程学院	39	213	6.0	14.0
2	盛望	北京工业大学生命科学与生物工程学院	44	109	6.0	8.0
3	马洪涛	北京工业大学生命科学与生物工程学院	9	26	3.0	5.0
4	赵振伯	北京工业大学生命科学与生物工程学院	1	0	0.0	0.0