禽源HSP70、HSP40和RPL4基因的克隆和表达

• 作者: 任红玉 张民秀 张艳芳 曾婷婷 王盛 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: HSP70基因 HSP40基因 RPL4基因 禽源 克隆和表达
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 92-97
• 页数: 6页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3299字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.03.020

摘要

本研究参照GenBank中编码禽源热休克蛋白HSP70、HSP40和核糖体蛋白RL4等的基因序列,分别设计特异性引物,采用RT-PCR扩增HSP70、HSP40和RPL4基因,经双酶切后克隆到真核表达载体pEF1α-Myc,得到重组质粒pEF1α-Myc-HSP70、pEF1α-Myc-HSP40和pEF1α-Myc-RPL4;将构建好的重组质粒,转染HEK293T细胞后,采用间接免疫荧光和Western-blot技术,对目的蛋白进行验证.结果表明,Myc-HSP70、Myc-HSP40和Myc-RPL4融合蛋白在HEK293T细胞内得到了正确表达.本研究为后续禽源HSP70、HSP40和RPL4基因的功能研究奠定了基础.