酶消化法分离和培养人源原代跟腱干细胞

• 作者: 佘远时 储文亚 张向鑫 李慧 王东来 虞宵 解敏 郭东昇 陈广祥
• 来源期刊: 生物骨科材料与临床研究
• 学科: 医学
• 关键词: 酶消化法 跟腱干细胞 分离培养 种子细胞 跟腱
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 论著·实验研究
• 页码范围: 37-42
• 页数: 6页
• 分类号: R329.2
• 字数: 4666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5972.2020.01.010

摘要

目的 建立人胎儿来源跟腱干细胞的分离方法,并对人源跟腱干细胞的生物学特性进行鉴定.方法 采用酶消化法从胎儿跟腱组织中分离培养跟腱干细胞;通过光学显微镜观察细胞形态;CCK-8法测定细胞增殖能力;流式细胞术检测表面抗原的表达情况;分别用成骨、成脂和成软骨诱导培养液诱导其分化,RT-qPCR鉴定分化标记基因表达;同时对跟腱干细胞蛋白表达进行检测,探究其生物学特性.结果 从胎儿来源的跟腱组织中提取的跟腱干细胞具有特征性的细胞形态;在P3代以内,细胞增殖差异无统计学意义;细胞高表达CD44、CD90,不表达CD34、CD45;细胞通过诱导分化后成功向骨、脂肪及软骨细胞分化,相关性基因表达升高;人源跟腱干细胞表达Collagen I、CollagenⅢ、Tenascin-C、Scleraxis.结论 酶消化法是分离、培养跟腱干细胞的有效办法,跟腱干细胞表达与跟腱损伤修复有关的蛋白,为跟腱干细胞的鉴定及临床应用提供理论依据.