体积排阻高效液相色谱法测定酸溶性I型胶原蛋白含量的研究

• 作者: 刘曦 吴晓丽 岳卫华 林红赛 黄永富
• 来源期刊: 北京生物医学工程
• 学科: 医学
• 关键词: 酸溶性I型胶原蛋白 胶原蛋白含量 体积排阻高效液相色谱法 磷酸钠缓冲液 优化
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 123-130,157
• 页数: 9页
• 分类号: R318
• 字数: 4262字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-3208.2020.02.003

摘要

目的 建立酸溶性I型胶原蛋白含量测定的体积排阻高效液相色谱法(size-exclusion high-performance liquid chromatography,SE-HPLC)并进行方法确认,为快速、准确测定酸溶性I型胶原蛋白含量提供技术参考.方法 通过优化流动相组成、流速及柱温等因素来改善峰形,提高柱效,确定最佳检测条件,采用含DAD检测器的Agilent 1260高效液相色谱仪进行检测,检测波长为210 nm,外标法定量并进行方法学研究.结果 选择300 mmol/L磷酸钠-150 mmol/L氯化钠(pH=6.0)为流动相,设定流速为0.4 mL/min,柱温为20℃时,酸溶性I型胶原蛋白在体积排阻色谱柱Agilent Bio SEC-5(300?,4.6 mm×300 mm,5μm)(1?=0.1 nm)上的分离能获得最佳柱效.方法学研究结果表明,酸溶性I型胶原蛋白在1.5～120.0μg/mL范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),定量限为0.6μg/mL.用建立的方法连续进样6次,检测供试品溶液的I型胶原蛋白含量,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.1％;加标回收率为92.8％～101.3％.结论 该方法简便、快速,准确度、精密度和稳定性良好,可用于制备医疗器械产品的酸溶性I型胶原蛋白含量的测定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳卫华		26	26	2.0	3.0
2	林红赛		17	14	2.0	2.0
3	黄永富		22	25	2.0	3.0
4	刘曦		8	9	2.0	2.0
5	吴晓丽		3	0	0.0	0.0