过表达TRAF6对人急性髓系白血病细胞自噬活性的影响

• 作者: 唐雨婷 张伶 敬一佩 杨丽媛 汪路 蒋雪坷 金红君 陶瑶 雷力
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 肿瘤坏死因子受体相关因子6 急性髓系白血病 自噬 凋亡 增殖
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 26-37
• 页数: 12页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2020.01.0004

摘要

该文旨在探讨过表达肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)对人急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞自噬活性的影响.利用基因表达数据库GEO分析TRAF6在AML患者白血病细胞中的mRNA表达水平.通过癌症基因组图谱TCGA分析TRAF6表达与AML患者临床预后的关系.将TRAF6重组质粒载体转染人AML细胞系(KG-1a和THP-1),采用自噬激活剂雷帕霉素(Rapamycin)和自噬相关抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)、巴弗洛霉素A1(bafilomycin A1,Baf-A1)分别处理AML细胞.荧光定量PCR、蛋白免疫印迹技术检测过表达TRAF6后白血病细胞自噬标志物(LC3和p62) mRNA和蛋白水平;免疫荧光方法检测LC3绿色荧光斑点结构(puncta);流式细胞术检测细胞凋亡率;CCK-8实验检测AML细胞的体外增殖能力.结果 显示,AML患者白血病细胞高表达TRAF6 (P＜0.01);TRAF6高表达的白血病患者总体生存率和无事件生存率均较TRAF6低表达组显著降低(P=0.01).TRAF6重组质粒转染能够显著增加两株AML细胞系中TRAF6的mRNA和蛋白水平(P＜ 0.05). Rapamycin处理能够激活AML细胞系自噬水平,过表达TRAF6后AML细胞LC3 mRNA和LC3Ⅱ蛋白水平表达上调(P＜0.05)、p62 mRNA和蛋白水平下调(P＜0.05)以及LC3puncta聚集增多.用Baf-A1处理以阻断过表达TRAF6的白血病细胞系中的自噬流后,LC3Ⅱ蛋白表达水平显著提高(P＜0.05).3-MA处理过表达TRAF6的白血病细胞后,LC3Ⅱ蛋白表达减少、p62蛋白表达增加(P＜0.05).此外,过表达TRAF6降低白血病细胞凋亡率和促进细胞的体外增殖(P＜ 0.001),而过表达TRAF6后联合3-MA处理则可逆转TRAF6对白血病细胞的抗凋亡和促增殖作用(P＜0.001).以上研究结果提示,过表达TRAF6能够增强AML细胞的自噬活性,促进AML细胞的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张伶		35	78	5.0	8.0
2	金红君		6	19	2.0	4.0
3	杨丽媛		3	0	0.0	0.0
4	汪路		2	0	0.0	0.0
5	唐雨婷		2	0	0.0	0.0
6	陶瑶		2	0	0.0	0.0
7	敬一佩		2	0	0.0	0.0
8	雷力		1	0	0.0	0.0
9	蒋雪坷		1	0	0.0	0.0