牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿BP亚基单克隆抗体胶体金标记试纸条制备

• 作者: 吴金花 布日额 王金良 锡林高娃 陈金龙
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 无乳链球菌 BP基因 单克隆抗体 胶体金
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 45-49
• 页数: 5页
• 分类号: R378.1
• 字数: 3762字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2019.00.186

摘要

目的 本研究通过优化牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿BP亚单位单克隆抗体的性能,制备胶体金标记检测牛乳腺炎无乳链球菌的试纸条.方法 利用pET30a(+)-BP重组质粒表达蛋白纯化物免疫小鼠,无菌取脾细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选杂交瘤细胞,制备单克隆抗体,对单克隆抗体进行胶体金标记后制备检测试剂盒,并确定其灵敏度、特异性等技术指标.结果 经数轮筛选,获得1株阳性杂交瘤细胞株,抗体效价达到1∶256 00.胶体金标记试纸条灵敏度量达到106 CFU/mL.特异性测试结果表明,胶体金标记试纸条与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、副结核杆菌、化脓性链球菌培养物人工污染的牛乳样均无阳性反应,只与无乳链球菌乳样出现阳性结果.结论 该胶体金标记免疫层析试纸条,具有实际应用价值,将为牛乳腺炎的筛查检测提供新型、便捷的技术产品.