大鼠丘脑酪氨酸羟化酶调控丙泊酚诱导的镇静作用

• 作者: 傅风华 张一佳 曹燕卿 苏瑞斌 谭博 邵帅
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 丙泊酚 翻正反射 丘脑 磷酸化蛋白质组学 酪氨酸羟化酶
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 95-103
• 页数: 9页
• 分类号: R964|R971.2
• 字数: 5077字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2020.02.002

摘要

目的 通过定量磷酸化蛋白质组学研究丙泊酚诱导大鼠丘脑镇静作用的新型调节机制.方法①采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术对丙泊酚(100 mg·kg-1,ip)诱导镇静模型SD大鼠丘脑差异磷酸化蛋白质进行标记和定量分析;基因本体(GO)富集分析差异磷酸化蛋白质的生物进程、细胞组分及分子功能;Western印迹法检测大鼠丘脑酪氨酸羟化酶(TH)第19位丝氨酸磷酸化表达水平.②利用TH抑制剂甲基酪氨酸(20 mg·kg-1,提前30 min ip给药),考察其对丙泊酚诱导C57BL/6J小鼠翻正反射消失的诱导时间、持续时间和翻正反射消失率的影响.结果质谱结果显示,与正常对照组相比,丙泊酚组SD大鼠丘脑中共92个磷酸化蛋白质表达水平发生改变,其中TH第19位丝氨酸磷酸化水平显著下调(P<0.01);与Western印迹法结果一致(P<0.05).丙泊酚(70～120 mg·kg-1)剂量依赖性地增加小鼠的翻正反射消失率,TH抑制剂甲基酪氨酸预处理可使丙泊酚诱导小鼠翻正反射消失率的半数有效剂量(ED50)由92.32 mg·kg-1(95％CI:90.60～94.08,R2=0.9969)降至85.38 mg·kg-1(95％CI:81.30～89.67,R2=0.9768),量效曲线左移.与单用丙泊酚组比较,甲基酪氨酸预处理组可显著延长丙泊酚(90,100和120 mg·kg-1)诱导的C57BL/6J小鼠翻正反射消失持续时间(P<0.05).结论本研究筛选出大鼠丘脑中多种磷酸化蛋白质参与调控丙泊酚诱导的镇静效应,抑制TH的活性可显著增强丙泊酚的镇静作用.