聚凝胺提高慢病毒载体对树突状细胞的转染率

• 作者: 孙凯伦 宫念樵 张季
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 聚凝胺 慢病毒载体 骨髓源性树突状细胞
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 37-39
• 页数: 3页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2020.01.011

摘要

目的 探讨聚凝胺对小鼠骨髓源树突状细胞(BMDCs)的毒性作用以及聚凝胺促慢病毒载体转染BMDCs的最佳浓度.方法 制备BMDCs悬液,随机分为实验组和对照组.实验组用不同浓度的聚凝胺处理,对照组中加入等量磷酸盐缓冲液(PBS),采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双标记法评价聚凝胺对BMDCs的毒性作用.向BMDCs悬液中加入慢病毒载体[感染复数(MOI)=10],实验组用不同浓度的聚凝胺处理,对照组加入等量PBS,每天采用荧光显微镜动态观察各组绿色荧光蛋白(GFP)表达.刺激BMDCs成熟后,采用流式细胞术定量检测GFP表达.各组之间两两比较采用独立样本t检验.结果 聚凝胺浓度≥11 mg/L时,活细胞数目显著减少[吸光度(A)值(0.881±0.007)比(1.031±0.017),t=7.832,P＜0.05],差异有统计学意义.安全浓度范围内,使用聚凝胺能显著提高GFP表达,聚凝胺浓度为8 mg/L时,GFP表达最高.结论 聚凝胺对BMDCs存在剂量依赖的毒性作用,安全浓度范围内,聚凝胺可明显提高慢病毒载体对BMDCs的转染率,最适浓度为8 mg/L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宫念樵	华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所	28	98	6.0	8.0
2	孙凯伦	华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所	1	0	0.0	0.0
3	张季	华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所	1	0	0.0	0.0