α-硫辛酸对缺血再灌注诱导的PC12细胞应激性凋亡抑制作用的研究

• 作者: 任真奎 吕菊 吴昌学 禹文峰 胡玉梅 谢鹏
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 再灌注损伤 大鼠 α-硫辛酸 肾上腺嗜铬神经瘤细胞 细胞损伤 氧糖剥夺/再灌注 内质网压力介导的凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 373-378,386
• 页数: 7页
• 分类号: R965
• 字数: 4304字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2020.04.001

摘要

目的:探讨α-硫辛酸(α-LA)抑制缺血再灌注诱导的大鼠肾上腺嗜铬神经瘤细胞(PC12)内质网应激性凋亡的分子机制.方法:传代培养PC12细胞分为正常组(Control组)、氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)4 h组(OGD4组)、OGD 4 h后复氧不同时间段组(OGD4+R6、OGD4+R12、OGD4+R18以及OGD4+R24组)、在OGD4 h后复氧阶段给予不同浓度(0.01、0.05、0.1、0.25、0.5、1、2、5和10 mmol/L)α-LA共同复氧培养24 h作为α-LA处理组(OGD/R+α-LA组);Control组细胞在完全培养基、正常氧培养箱中培养,OGD/R组和OGD/R+α-LA组细胞按相应方法进行培养处理;蛋白免疫印迹法检测各组PC12细胞中内质网应激[葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)]和凋亡[B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)、裂解型胱天蛋白水解酶3(Cleaved-caspase3)]相关分子的表达;细胞活性检测试剂盒-8(CCK-8试剂盒)检测各组PC12细胞的存活率,分析α-LA作用的有效工作浓度.结果:与Control组比较,OGD4 h后复氧不同时间段均诱导了PC12细胞发生内质网应激性的凋亡,表现为内质网应激相关分子GRP78、CHOP和凋亡蛋白Bax、Cleaved-caspase3的表达伴随复氧时间段的延长而逐渐升高(P<0.05),在OGD4+R24组升高最明显(P<0.05);与Control组比较,OGD4+R24组细胞的存活率明显下降(P<0.05);与OGD4+R24组比较,OGD/R+α-LA组α-LA在0.05～5 mmol/L浓度范围内增加了细胞的存活率(P<0.05),0.5 mmol/L时细胞存活率升高最明显(P<0.05),10 mmol/L时细胞存活率明显降低(P<0.05);与OGD4+R24组比较,OGD/R+α-LA(0.5 mmol/L)组凋亡分子Bax、Cleaved-caspase3以及内质网应激相关分子GRP78、CHOP表达明显降低(P<0.05).结论:缺血再灌注诱导了PC12细胞发生内质网应激性的凋亡,α-LA能够降低缺血再灌注诱导的PC12损伤,其机制可能与降低了缺血再灌注诱导的内质网应激性凋亡有关.