萆薢总皂苷对尿酸钠诱导THP-1细胞Toll样受体/核转录因子-κB (TLR/NF-κB)信号通路的影响

• 作者: 姜璐 李国莺 章维志 陈光亮
• 来源期刊: 中国实验方剂学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 萆薢总皂苷 尿酸钠 Toll样受体/核转录因子-κB (TLR/NF-κB)信号通路 炎性因子
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 34-41
• 页数: 8页
• 分类号: R2-0|R22|R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200401

摘要

目的:研究萆薢总皂苷(TSD)对尿酸钠(MSU)诱导THP-1细胞Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路的影响,探讨其抗痛风性关节炎的可能作用机制.方法:佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞,分为正常组,模型组,TSD低、中、高质量浓度组(1,3,10 mg·L-1)和秋水仙碱组(0.2 mg-L-1),除正常组外,其余各组均用400 mg·L-1MSU刺激6h,诱导体外炎症反应.噻唑蓝(MTT)比色法检测TSD对细胞活力影响;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液炎性因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的分泌水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TLR4,髓样分化因子88(MyD88)及NF-κB蛋白表达;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测TLR4,NF-κB及IL-1β前体(Pro-IL-1β) mRNA表达水平;免疫荧光法检测NF-κB p65的核位移情况.结果:0～32 mg·L-1TSD对细胞活力基本无影响;与正常组比较,模型组炎性因子TNF-α及IL-1β的分泌水平显著升高(P＜0.01),通路关键蛋白(TLR4,MyD88及NF-κB)和基因(TLR4,NF-κB及Pro-IL-1β)的表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,1～30 mg·L-1TSD可显著下调炎性因子TNF-α及IL-1β的分泌(P＜0.01),通路关键蛋白(TLR4,MyD88及NF-κB)和基因(TLR4,NF-κB及Pro-IL-1β)的表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01),细胞核内NF-κB p65叠加减少,部分转位至胞浆,抑制NF-κB p65核转位.结论:TSD可能通过下调TLR4,NF-κB及Pro-IL-1βmRNA的表达,减少炎性因子TNF-α及IL-1β分泌而发挥抗炎作用.