迟缓爱德华菌FliC-TolC融合蛋白表达及免疫特性研究

• 作者: 于秀剑 刘晨 刘莉 史秋梅 吴同垒 康元环 张志强 李昕甜 杜万年 王苗 田占云
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 迟缓爱德华菌 FliC-TolC融合蛋白 蛋白表达 免疫保护力
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 18-22
• 页数: 5页
• 分类号: S852.61
• 字数: 3797字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201906023

摘要

鞭毛蛋白FliC与外膜蛋白TolC均具有免疫保护效果,其中FliC蛋白具有疫苗佐剂的特性,但目前尚未有关迟缓爱德华菌(E.tarda)FliC-TolC融合产物免疫动物的免疫效果的相关报道.为研究E.tarda FliC-TolC融合蛋白的免疫特性,本研究利用融合PCR方法扩增获得fliC-tolC片段,构建重组载体pET-28a-fliC-tolC,并利用E.coliBL21表达系统表达了融合蛋白FliC-TolC.将纯化的FliC-TolC、TolC、FliC蛋白免疫小鼠后,以E.tarda强毒株攻毒评估免疫效果;并利用斑马鱼模型进行了平行试验.结果 显示,本研究克隆了E.tarda fliC-tolC基因并表达和纯化了相应重组蛋白FliC-TolC;FliC-TolC蛋白激发小鼠产生的抗体水平优于FliC、TolC蛋白单独免疫组,表明FliC-TolC蛋白具有优良的免疫原性.攻毒试验表明FliC-TolC蛋白组小鼠对强毒株可产生较好的抵抗力,相对保护率为95％;斑马鱼攻毒试验相对保护率为60％.本研究证实了E.tarda重组蛋白FliC-TolC的免疫效力,为进一步研制E.tarda亚单位疫苗提供了参考和借鉴.