非洲猪瘟病毒LFD-RPA快速检测方法的建立

• 作者: 刘建利 史卫军 吴江 曹琛福 曾少灵 林彦星 花群义 赵现锋 阮周曦
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 重组酶聚合酶扩增 侧流层析试纸条 快速检测
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 952-956
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0144

摘要

本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV)B646L基因保守序列设计nfo RPA特异性引物和探针,建立了ASFV核酸LFD-RPA快速检测法.结果 表明,该方法特异性强,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪A型塞内卡病毒(SVA)等病原核酸无交叉反应;最低可以检测到1.57×102 copies/μL重组质粒pUC-B646L;检测时间短,其中RPA扩增20 min,LFD检测10～20 min.应用该法及OIE推荐的荧光PCR法对24个模拟样品进行检测,检测结果一致.对50份已知的临床样品核酸进行检测,阳性符合率为73.3％.上述结果表明,本研究建立的LFD-RPA快速检测方法操作简便,为ASFV现场快速检测提供了技术支持.