清肠化湿方对溃疡性结肠炎湿热证小鼠NLRP6蛋白及相关炎症因子表达的影响

• 作者: 傅书山 朱磊 沈洪 王琼
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 溃疡性结肠炎 清肠化湿方 pyrin结构域蛋白6 白介素-1β 白介素-18
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 582-588
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/j.cjim.20200309.312

摘要

目的 探讨清肠化湿方对溃疡性结肠炎(UC)湿热证小鼠NLRP6蛋白及相关炎症因子和紧密连接蛋白Claudin-2、Claudin-5的影响.方法 60只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白组,模型组,美沙拉嗪组,低、中、高剂量中药组.除空白组外,其余小鼠置于高温、高湿环境,喂养高糖高脂饲料,饮用2.5％葡聚糖硫酸钠(DSS)蒸馏水1周造成UC湿热证模型.低、中、高剂量中药组分别予浓度8.125、16.250、32.500 g/(kg·d)清肠化湿方灌胃,美沙拉嗪组小鼠予美沙拉嗪溶液灌胃,空白组和模型组给予相同体积的生理盐水灌胃.灌胃7天,观察小鼠的一般情况、体重、粪便性状及隐血情况,进行DAI评分,记录小鼠每小时排出的湿粪粒数以及湿粪重量,测量小鼠结肠长度.HE染色观察结肠病理情况;Western Blot法检测结肠NLRP6、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白(Caspase-1)、紧密连接蛋白(Claudin-2)、Claudin-5表达水平;ELISA法检测血清白细胞介素-18 (IL-18)、IL-1β含量;Real-time PCR法检测结肠NLPR6、caspase-1、Claudin-2、Claudin-5 mRNA表达水平.结果 与空白组比较,模型组小鼠DAI评分升高(P＜0.01),结肠长度变短(P＜0.01);结肠黏膜病理受损严重;NL RP6、Claudin-5蛋白表达降低(P＜0.05),Caspase-1、Claudin-2蛋白表达增加(P＜0.05,P＜0.01);血清中炎症因子IL-1β含量增高(P＜0.05);NLRP6、Claudin-5 mRNA表达降低(P＜0.01),Caspase-1、Claudin-2 mRNA表达增加(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,美沙拉嗪组、中剂量中药组DAI评分降低(P＜0.01),结肠长度增长(P＜0.01)、病理情况改善;中剂量中药组NLRP6、Claudin-5蛋白表达上调(P＜0.05),各治疗组Caspase-1蛋白表达减少(P＜0.05),美沙拉嗪组及中、高剂量中药组Claudin-2蛋白表达减少(P＜0.01);美沙拉嗪组及低、中剂量中药组血清IL-1β含量降低(P＜0.05,P＜0.01),美沙拉嗪组、高剂量中药组NLRP6 mRNA表达上调(P＜O.01,P＜0.05),各治疗组Caspase-1 mRNA表达下调(P＜0.05),美沙拉嗪组及中、高剂量组Claudin-2 mRNA表达下调,中、高剂量组Claudin-5 mRNA表达上调(P＜0.05).结论 清肠化湿方能够调节NLRP6蛋白及相关炎症因子、紧密连接蛋白表达水平,从而减轻肠道炎症反应,缓解肠黏膜损伤.