抗猪瘟病毒E2蛋白单抗9A4H4的鉴定

• 作者: 包菲 李红卫 涂长春 米士江 龚文杰
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 E2蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 页码范围: 198-206
• 页数: 9页
• 分类号: S852.651
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2018.4352

摘要

为鉴定抗猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体9A4H4与不同猪瘟病毒(CSFV)株的反应性,将其与猪瘟病毒石门株、猪瘟兔化弱毒疫苗株和前期分离获得的106株猪瘟流行毒株进行IFA验证.在此基础上,利用昆虫杆状病毒系统表达的基因1型、2型和3型代表性毒株的E2蛋白进行了Western blot验证.试验还利用含有或不含β-巯基乙醇的SDS上样缓冲液对真核表达和原核表达的石门株E2蛋白进行处理,并与单抗9A4H4进行反应,初步鉴定了该单抗所识别抗原表位的类型,并利用石门株进行中和试验验证该抗体对CSFV的中和能力.间接免疫荧光试验结果表明:单抗9A4H4能与石门株、猪瘟兔化弱毒疫苗株、基因1型以及大多数的基因2.1b亚亚型、2.2、2.3基因亚型的毒株反应,与绝大多数的2.1a、2.1c、2.1g和2.1h基因亚亚型的毒株不反应,该结果与单抗和病毒E2蛋白的反应结果完全一致.Western blot结果表明:单抗9A4H4只与真核表达的非还原型石门株E2蛋白反应,与真核表达的还原型E2蛋白以及原核表达的石门E2蛋白不反应,表明该抗体识别的抗原表位为构象表位.中和试验结果表明,单抗9A4H4对CSFV石门株没有中和能力.