沉默重组蛋白2对NCI-H1688细胞的抑制作用及其Wnt/β连环蛋白信号通路机制

• 作者: 刘忠 张岚 潘殿柱 陈艳 马艳梅
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 重组蛋白2 Wnt/β连环蛋白信号通路 小细胞肺癌 细胞增殖 增殖细胞核抗原 细胞周期蛋白D1 糖原合成酶激酶3
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 751-758
• 页数: 8页
• 分类号: R734.2
• 字数: 4824字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200414

摘要

目的:探讨T细胞淋巴瘤常见重排蛋白2 (Frat2)通过Wnt/β连环蛋白(β-catenin)信号通路对小细胞肺癌NCI-H1688细胞增殖的影响,阐明其可能机制.方法:选取生长状态良好的人小细胞肺癌NCI-H1688细胞和正常支气管上皮样细胞HBE细胞,采用Western blotting法和逆转录实时荧光定量-聚合酶链反应(Real-Time RT-qPCR)法分别检测NCI-H1688细胞和HBE细胞中Frat2蛋白及mRNA表达水平.NCI-H1688细胞随机分为空白对照组、阴性对照组、Frat2-siRNA组和Frat2-siRNA+ XAV组.空白对照组细胞不转染,阴性对照组细胞转染阴性对照慢病毒,Frat2-siRNA组转染Frat2-siRNA慢病毒,Frat2-siRNA+ XAV组转染Frat2-siRNA慢病毒并同时加入4 μmol·L-1Wnt信号通路抑制剂XAV939.采用Western blotting法和Real-TimeRT-qPCR法分别检测转染后各组细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平,采用MTT法检测各组细胞增殖活性,采用流式细胞术检测不同细胞周期细胞百分率,采用Western blotting法检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、c-myc、细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)、β-catenin和磷酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3β)蛋白表达水平.结果:与HBE细胞比较,NCI-H1688细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平明显升高(P＜0.01).与空白对照组和阴性对照组比较,Frat2-siRNA组NCI-H1688细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平明显升高(P＜0.05);空白对照组与阴性对照组NCI-H1688细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).与空白对照组和阴性对照组比较,Frat2-siRNA组细胞增殖活性降低(P＜0.05),G0/G1期细胞百分率升高(P＜0.05),S期和G2/M期细胞百分率降低(P＜0.05),PCNA、c-myc、Cyclin D1、β-catenin和pGSK-3β蛋白表达水平降低(P＜0.05);与Frat2-siRNA组比较,Frat2-siRNA+ XAV组细胞增殖活性降低(P＜0.05),G0/G1期细胞百分率升高(P＜0.05),S期和G2/M期细胞百分率降低(P＜0.05),PCNA、c-myc、Cyclin D1、β-catenin和pGSK-3β蛋白表达水平降低(P＜0.05);空白对照组与阴性对照组上述各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:沉默Frat2可抑制小细胞肺癌细胞增殖,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张岚	锦州医科大学附属第一医院呼吸科	9	14	2.0	3.0
2	马艳梅	锦州医科大学附属第一医院呼吸科	27	72	5.0	7.0
3	潘殿柱	锦州医科大学附属第一医院呼吸科	7	21	3.0	4.0
4	刘忠	锦州医科大学附属第一医院呼吸科	4	23	2.0	4.0
5	陈艳	锦州医科大学附属第一医院呼吸科	1	0	0.0	0.0