猪流行性腹泻病毒RT-LAMP检测方法的建立与应用

• 作者: 吴惠明 吴迪 周德刚 宋彦军 张启龙 张玮 李蕊 杜鹃 栗云鹏 王培 王林 程汝佳 韦海涛 高晓龙
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: LAMP 猪流行性腹泻病毒 快速检测 检测方法
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 微生物与免疫
• 页码范围: 1-9
• 页数: 9页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4040字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11751/ISSN.1002-1280.2020.05.01

摘要

为建立一种适用于现场快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M基因编码区序列,分别设计合成3组引物,通过对引物的筛选和反应条件优化,建立了PEDV RT-LAMP可视化快速检测方法.灵敏度和特异性试验结果显示,本方法在65℃45 min对PEDV的检测灵敏度为2 copies/μL,与猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒均无交叉反应.利用该方法对30份送检的临床样品进行检测,检出阳性样品8份,与荧光定量RT-PCR检测结果一致.试验表明,所建立的RT-LAMP检测方法具有特异性好、灵敏度高、快速、结果可视、设备适用范围广等优点,适用于PEDV现场快速检测.