丹酚酸A激活AKT/mTOR/4EBP1通路缓解脂多糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡和氧化应激

• 作者: 刘晓晨 崔勤涛 王俊华 王学惠 苏国宝 马海英
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 丹酚酸A 蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 起始因子4E结合蛋白 H9c2 细胞凋亡 氧化应激
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-23
• 页数: 8页
• 分类号: R963
• 字数: 3919字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2020.01.003

摘要

目的 探究丹酚酸A(Sal A)对脂多糖(LPS)诱导的氧化应激性损伤H9c2心肌细胞增殖、凋亡,以及蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/起始因子4E结合蛋白(4EBP1)通路相关蛋白表达的影响.方法 用LPS诱导制备H9c2心肌细胞氧化应激性损伤模型,分别用含Sal A 5,10和20 mg·L-1的DMEM培养基培养细胞24 h,加LPS 1 mg·L-1继续孵育24 h.用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色观察H9c2心肌细胞存活;采用流式细胞术检测H9c2心肌细胞凋亡和线粒体膜电位;用试剂盒检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量;Western印迹法检测胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶9、存活蛋白、Bax/Bcl-2,AKT、磷酸化AKT(p-AKT)、mTOR、p-mTOR、4EBP1和p-4EBP1蛋白表达水平.结果 与细胞对照组比较,模型组EdU红色标记的细胞减少(P<0.05);与模型组比较,Sal A 5,10和20 mg·L-1处理组EdU红色标记的细胞增多(P<0.05).Sal A能降低培养液中LDH活性及细胞内MDA和GSH含量,增加胞内SOD活性(P<0.05),减少心肌细胞的凋亡率(P<0.05),降低心肌细胞线粒体膜电位的下降速度(P<0.05).Sal A 10和20 mg·L-1处理后,活化胱天蛋白酶3、活化胱天蛋白酶9和Bax/Bcl-2蛋白水平显著下调(P<0.05),存活蛋白水平显著上调(P<0.05);与细胞对照组比较,模型组AKT/mTOR/4EBP1磷酸化水平均显著降低(P<0.05).与模型组比较,Sal A 10和20 mg·L-1组AKT和mTOR磷酸化水平均显著升高(P<0.05).结论 Sal A通过激活AKT/mTOR/4EBP1通路、减少心肌细胞凋亡并降低心肌细胞线粒体膜电位的下降速度,减缓了LPS诱导的H9c2心肌细胞凋亡和氧化应激,表明Sal A对LPS造成的氧化应激损伤心肌细胞具有保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马海英	新乡医学院第一附属医院心血管外科	11	113	4.0	10.0
2	崔勤涛	新乡医学院第一附属医院心血管外科	14	59	4.0	7.0
3	王俊华	新乡医学院第一附属医院心血管外科	4	0	0.0	0.0
4	刘晓晨	新乡医学院第一附属医院心血管外科	6	6	1.0	2.0
5	王学惠	新乡医学院第一附属医院心血管外科	25	108	6.0	10.0
6	苏国宝	新乡医学院第一附属医院心血管外科	5	0	0.0	0.0