FUNDC1通过调控线粒体分裂影响高糖损伤H9c2心肌细胞凋亡的机制研究

• 作者: 郑君毅 张莹莹 刘园园 陈孟英 郭绪昆
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 肌细胞，心脏 线粒体 细胞凋亡 FUNDC1 信号通路
• 年，卷（期）: 2022,（8）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 791-795
• 页数: 4页
• 分类号: R541
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20220348

摘要

目的 探讨含FUN14域蛋白1（FUNDC1）在高糖损伤的H9c2心肌细胞中通过调控线粒体分裂影响心肌细胞凋亡的作用机制。方法 体外培养H9c2心肌细胞并建立高糖损伤模型，分别进行细胞转染，使用腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）激活剂5-氨基-4-咪唑羧基酰胺核苷（AICAR）后，分为正常对照组（CTRL组）、高糖组（HG组）、HG+shRNA-NC组（转染shRNA-NC的HG组细胞）、HG+shRNA-FUNDC1组（转染shRNA-FUNDC1的HG组细胞）和HG+AICAR组（使用AICAR的HG组细胞）。MTT法检测细胞存活率；酶标仪检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放量；激光共聚焦显微镜观察线粒体结构；Western blot检测线粒体动力相关蛋白1（DRP1）、分裂蛋白1（FIS1）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、活化的胱天蛋白酶3（Cleaved Caspase-3）、FUNDC1和GAPDH的蛋白表达水平。结果 与CTRL组比较，HG组细胞存活率降低，LDH释放量升高，线粒体DRP1（DRP1-mito）、FIS1、Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高，胞浆DRP1（DRP1-cyto）和Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.05）。与HG组比较，HG+shRNA-FUNDC1组细胞存活率升高，LDH释放量明显降低，DRP1-mito、FIS1、Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平降低，DRP1-cyto和Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.05）。HG+shRNA-NC组和HG组比较，各指标差异均无统计学意义（P>0.05）。CTRL组线粒体主要呈线状结构，HG组和HG+shRNA-NC组线粒体均主要呈点状结构；与HG组比较，HG+shRNA-FUNDC1组线粒体线状结构增多，点状结构减少。与CTRL组比较，HG组FUNDC1蛋白表达水平升高（P<0.05）。与HG组比较，HG+AICAR组FUNDC1蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论 FUNDC1通过调控线粒体分裂影响高糖引起的H9c2心肌细胞凋亡，AMPK信号通路参与该过程。