微小RNA-149-5p调控丝氨酸-精氨酸蛋白激酶1基因对肾癌细胞侵袭、迁移的影响

• 作者: 冯子煜 杨艳芳 杨锦建 毕建朋 贾占奎 顾朝辉
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 微小RSA-149-5p 丝氨酸-精氨酸蛋白激酶1 肾癌 转移 侵袭
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 93-96
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2020.01.027

摘要

目的 探讨肿瘤抑制因子微小RNA(rniRNA,miR)-149-5p对肾癌细胞转移潜能的影响及机制.方法 GRC-1细胞分成miR-149-5p组(转染miR-149-5p mimics)、miR-NC组(转染mimics control)、miR-149-5p+丝氨酸-精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)组(共转染miR-149-5p mimics、pcDNA3.1-SRPK1)、miR-149-5p+ vector组(共转染miR-149-5pmimics、pcDNA3.1).实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-149-5p水平,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移能力变化,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中N-钙黏蛋白(N-cadhefin)、E-钙黏蛋白(E-cadhefin)蛋白水平.利用在线靶基因预测软件发现SRPK1可能是miR-1496p的靶基因,双荧光素酶报告系统鉴定靶向关系.应用SPSS 21.0统计软件分析.结果 miR-149-5p组的GRC-1细胞中miR-1496p(2.69±0.27比1.01±0.08)和E-cadhefin(0.81±0.09比0.42±0.05)水平显著高于miR-NC组,侵袭数目[(70.81±6.35)个比(110.64±9.67)个]、迁移数目[(108.46±9.27)个比(162.76±12.71)个]、N-cadherin(0.46±0.05比0.79±0.11)和SRPK1(0.45±0.06比0.92±0.08)蛋白水平显著低于miR-NC组,差异均有统计学意义(FmiR-149-5p=95.385,F侵袭数目=20.216,F迁移数目=22.010,FN-cadherin=15.100,FE-cadhein=31.331,FSRPK1=31.785,P＜0.05).共转染SRPK1野生型质粒的miR-149-5p组细胞荧光素酶活性(0.37±0.04比1.00±0.11)显著低于miR-NC组,差异有统计学意义(t=16.150,P＜0.05).共转染SRPK1突变型质粒的miR-149-5p组细胞荧光素酶活性(0.99 ±0.10比1.00±0.09)与miR-NC组比较差异无统计学意义(t=0.220,P＞0.05).miR-149-5p+ SRPK1组的GRC-1细胞中E-cadherin(0.45±0.04比0.80±0.08)水平显著低于miR-149-5p+ vector组,侵袭数目[(99.51±7.48)个比(71.84±5.37)个]、迁移数目[(145.06±11.14)个比(107.63±10.20)个]、N-cadherin(0.86±0.10比0.47±0.04)和SRPK1(0.89±0.06比0.50±0.07)蛋白水平显著高于miR-149-5p+ vector组,差异均有统计学意义(tSRPK1=7.327,t侵袭数目=5.205,t迁移数目=4.292,tN-cadherin=6.272,tE-cadherin=6.778,P＜0.05).结论 肿瘤抑制因子miR-149-5p靶向负调控SRPK1表达降低肾癌细胞的迁移和侵袭能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨锦建	郑州大学第一附属医院泌尿外科	109	276	7.0	13.0
2	贾占奎	郑州大学第一附属医院泌尿外科	75	144	6.0	10.0
3	顾朝辉	郑州大学第一附属医院泌尿外科	41	55	5.0	6.0
4	毕建朋	郑州大学附属儿童医院河南省儿童医院郑州儿童医院泌尿外科	3	1	1.0	1.0
5	冯子煜	郑州大学第一附属医院泌尿外科	6	5	1.0	2.0
6	杨艳芳	郑州大学附属儿童医院河南省儿童医院郑州儿童医院泌尿外科	7	12	2.0	3.0