MS2噬菌体介导展示猪繁殖与呼吸综合征病毒线性表位的嵌合纳米颗粒制备及免疫原性

• 作者: 刘保光 尚立芝 张振强 曾华辉 李欣欣 王国强 苏运芳 马红芳
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: MS2噬菌体 线性表位 嵌合纳米颗粒 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 618-625
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 字数: 5808字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2020.06.007

摘要

[目的]以MS2噬菌体外壳蛋白为载体,构建展示猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白上线性表位的嵌合纳米颗粒,并研究其免疫原性,为猪繁殖与呼吸综合征病毒或其他病毒表位展示提供新的方法和思路.[方法]利用重叠延伸PCR将GP5上优势线性表位基因序列插入到MS2噬菌体外壳蛋白基因上,构建重组载体,通过原核表达系统表达嵌合蛋白,目的蛋白经过硫酸铵沉淀和凝胶过滤层析纯化,用动态光散射和电镜对嵌合蛋白进行物理表征,通过蛋白印迹和动物免疫试验研究表位嵌合颗粒的免疫原性.[结果]成功将线性表位基因插入MS2噬菌体外壳蛋白基因,嵌合蛋白在原核表达系统中以水溶性表达,目的蛋白经过纯化,纯度达85％ 以上.嵌合蛋白在体外自组装形成了均一的、直径为25～31 nm的嵌合表位纳米颗粒,该嵌合颗粒免疫动物后,产生可以和灭活病毒反应的高水平抗体,具有良好的免疫原性.[结论]MS2噬菌体外壳蛋白可以耐受9个外源多肽(猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5上线性表位)的插入,在体外自组装形成嵌合病毒样颗粒.该颗粒将外源多肽高密度展示在表面,免疫动物可产生针对该表位的抗体.该技术可为猪繁殖与呼吸综合征病毒其他表位或更长串联表位的展示奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尚立芝	河南中医药大学中医药科学院	58	395	11.0	16.0
2	张振强	河南中医药大学中医药	108	465	10.0	15.0
3	王国强	河南中医药大学中医药科学院	9	44	5.0	6.0
4	曾华辉	河南中医药大学中医药科学院	4	1	1.0	1.0
5	李欣欣	河南中医药大学第一临床医学院	4	4	2.0	2.0
6	苏运芳	河南中医药大学中医药科学院	1	0	0.0	0.0
7	马红芳	河南农业大学牧医工程学院	1	0	0.0	0.0
8	刘保光	河南中医药大学中医药科学院	5	0	0.0	0.0