λRed技术构建肺炎克雷伯氏菌sRNA-sgrS基因缺失突变株

• 作者: 修宝林 吕雨泽 王雪萌 葛菁萍
• 来源期刊: 黑龙江大学工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: sRNA-sgrS基因 λRed同源重组技术 基因突变 肺炎克雷伯氏菌
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 生命科学与生物工程
• 页码范围: 81-88
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13524/j.2095-008x.2020.04.057

摘要

肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)以葡萄糖为底物进行发酵生产2,3-丁二醇(2,3-butanetriol,2,3-BD)的过程中,糖磷酸胁迫非编码小RNA(sugar-phosphate stress sRNA,sRNA-sgrS)通过调控菌体内葡萄糖浓度来解除菌体的应激效应.通过λRed同源重组技术,将构建的同源重组片段sgrSA1-EGFP-sgrSA2,经过酶切、纯化后,通过电转化将重组片段转入到含有pKD46质粒的野生型菌株K.pneumoniae HD79及突变型菌株K.pneumoniae HD79-02(△ldh,△ack)的感受态细胞中.经过荧光显微镜观察筛选阳性转化子,经过PCR验证K.pneumoniae HD79及K.pneumoniae HD79-02 sRNA-sgrS基因缺失重组菌株构建成功.利用λRed技术构建肺炎克雷伯氏菌sRNA-sgrS基因缺失突变株,可为后续探究菌体内外葡萄糖浓度对菌株产量2,3-BD的影响奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛菁萍		86	718	16.0	23.0
2	王雪萌		1	0	0.0	0.0
3	修宝林		3	0	0.0	0.0
4	吕雨泽		1	0	0.0	0.0