IGF-1激活20S蛋白酶体β5亚单位活性对N2a细胞活力的影响

• 作者: 曹静 牛晓洁 王婷玉 王必慧 陆利
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 关键词: 蛋白酶体 IGF-1 细胞活力 N2a细胞
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 155-160
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16557/j.cnki.1000-7547.2020.02.007

摘要

目的:探索胰岛素样生长因子(IGF-1)对蛋白酶体的作用,并观察其对小鼠神经母细胞瘤来源的N2a细胞活力的影响,寻找维持细胞活力的有效手段.方法:体外培养N2a细胞加入不同浓度的IGF-1后,分析N2a细胞肽基谷氨酰肽水解酶样(PGPH-L)、胰蛋白酶样(T-L)和糜蛋白酶样(CT-L)三种蛋白酶体活性的变化,real time RT-PCR比较分别具有PGPH-L活性、T-L活性和CT-L活性的20S蛋白酶体β1亚单位(PSMB1)、20S蛋白酶体β2亚单位(PSMB2)、20S蛋白酶体β5亚单位(PSMB5) mRNA水平的变化.双荧光素酶实验检测IGF-1对PSMB5转录活性的影响.CCK8实验和Hoechst 33342/PI染色实验检测IGF-1和PSMB5对N2a细胞活性和凋亡的影响.结果:应用不同浓度的IGF-1干预N2a细胞后,PGPH-L活性和CT-L活性均显著增高,其中CT-L活性升高最显著,50 ng/ml和100 ng/ml IGF-1干预后,CT-L活性分别是对照组的1.32倍(P＜0.05)和1.49倍(P＜0.01),但是IGF-1干预后T-L活性无显著变化;realtime RT-PCR结果显示应用100 ng/ml IGF-1作用后,PSMB5和PSMB1的mRNA表达水平显著上升(P＜0.05);双荧光素酶结果显示IGF-1能够上调N2a细胞PSMB5转录活性;CCK8实验和Hoechst 33342/PI染色结果表明IGF-1干预使N2a细胞活力增强(P＜0.01),凋亡细胞减少;相反,敲低PSMB5后,N2a细胞活力减弱(P＜0.05),凋亡细胞增多;使用IGF-1干预PSMB5-siRNA组,发现PSMB5-siRNA组细胞活力较NC-siRNA组降低(P＜0.05)、凋亡细胞增加.结论:IGF-1通过激活CT-L蛋白酶体活性,提高N2a细胞的活力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆利	山西医科大学人体解剖学教研室	38	155	7.0	10.0
2	曹静	山西医科大学人体解剖学教研室	15	95	5.0	9.0
3	王必慧	山西医科大学人体解剖学教研室	4	0	0.0	0.0
4	王婷玉	山西医科大学第二临床医学院	2	0	0.0	0.0
5	牛晓洁	山西医科大学人体解剖学教研室	3	3	1.0	1.0