低氧下K562细胞向红系分化进程中GATA-1与miR-451a表达的相关性研究

• 作者: 付成冰 刘芳 牛志鹏 胡彩艳
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 低氧 GATA结合蛋白1 微小RNA-451a 红系分化 K562细胞
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 663-672
• 页数: 10页
• 分类号: R363.2|R329.2+5
• 字数: 5596字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2020.04.012

摘要

目的:探讨低氧下人慢性髓细胞性白血病K562细胞向红系分化进程中GATA结合蛋白1(GATA binding protein-1,GATA-1)与微小RNA-451a(microRNA-451a,miR-451a)表达的相关性.方法:将K562细胞分为常氧组和低氧(1％O2)组,经40μmol/L氯化血红素分别诱导分化至48和72 h.RT-qPCR检测γ-珠蛋白(γ-globin)的mRNA表达,联苯胺染色观察细胞血红蛋白生成情况,流式细胞术检测CD235a的表达水平,验证K562细胞红系分化模型是否复制成功.在K562细胞向红系分化的不同时点,采用Western blot检测两组细胞GATA-1的蛋白表达情况;采用RT-qPCR检测两组细胞GATA-1 mRNA和miR-451a的表达水平并进行相关性分析.检测GATA-1过表达组、干扰组和阴性对照组K562细胞的红系分化指标,同时采用瑞氏-吉姆萨染色法分析上述组别细胞形态学的变化,明确GATA-1过表达和抑制后K562细胞的红系分化情况.RT-qPCR检测GATA-1过表达和抑制后miR-451a的表达变化.结果:两组细胞分化48 h和72 h后,γ-globin表达量、联苯胺染色阳性率和CD235a表达量均显著高于0 h(P<0.05),且低氧组72 h的γ-globin表达量、联苯胺染色阳性率和CD235a表达量均显著高于常氧组(P<0.05).低氧组GATA-1 mRNA和miR-451a的表达水平随红系分化过程均呈现上升趋势(P<0.05),并在72 h均显著高于常氧组(P<0.05).相关性分析结果显示,低氧下GATA-1 mRNA与miR-451a的表达呈正相关(P<0.01).GATA-1慢病毒感染K562细胞72 h后,低氧下过表达组γ-globin表达量、联苯胺染色阳性率、CD235a表达量及体积增大、核偏移和核缩小的细胞数均显著高于阴性对照组(P<0.05);72 h干扰组γ-globin表达量、联苯胺染色阳性率、CD235a表达量及体积增大、核偏移和核缩小的细胞数均显著低于阴性对照组(P<0.05).与阴性对照组相比,低氧下过表达GATA-1后,72 h时miR-451a的表达显著增高(P<0.05);干扰GATA-1后,72 h时miR-451a的表达显著降低(P<0.05).结论:低氧通过诱导GATA-1表达增高而上调miR-451a,从而促进K562细胞向红系分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘芳	青海大学医学院生物化学教研室	35	104	6.0	8.0
2	付成冰	青海大学医学院高原医学研究中心	4	1	1.0	1.0
6	牛志鹏	青海大学医学院生物化学教研室	1	0	0.0	0.0
7	胡彩艳	青海大学医学院生物化学教研室	4	1	1.0	1.0