基于RPA的鲤春病毒血症病毒核酸检测技术的建立与评价

• 作者: 兰文升 叶仕根 田城城
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 重组酶聚合酶扩增技术 鲤春病毒血症病毒 核酸检测 评价
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 99-106
• 页数: 8页
• 分类号: S851.34
• 字数: 5930字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.02.021

摘要

重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)是近几年新发展并普及应用的一种核酸扩增技术,能够实现检测设备小型化,从而满足现场诊断(point-of-care testing,POCT)的需求.本研究以鲤春病毒血症病毒(spring viraemia of carp virus,SVCV)为检测靶标,建立了SVCV的RPA检测技术,并分析了该方法的灵敏性、特异性和稳定性,评判了该技术应用于POCT的可能性.结果表明:基于RPA的检测方法灵敏度较高,检测下限可达4×103 PFU/mL,但比以Taq酶为基础的RT-PCR技术略低;特异性好,未发现对其他水生动物疫病病原,如传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)、传染性鲑鱼贫血病病毒(ISAV)等发生非特异性反应;稳定性良好,3次重复性试验的结果近乎一致.试验证明,该方法能够替代RT-PCR技术,应用于POCT的试剂和仪器设备研发.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶仕根	大连海洋大学水产与生命学院	39	100	7.0	8.0
2	田城城	大连海洋大学水产与生命学院	3	0	0.0	0.0
3	兰文升	深圳海关动植物检验检疫技术中心深圳市检验检疫科学研究院	1	0	0.0	0.0