鲤春病毒血症病毒糖蛋白的高效表达和纯化

• 作者: 何俊强 兰文升 刘荭 卢体康 史秀杰 郑晓聪 高隆英
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 糖蛋白 表达 鲤春病毒血症病毒
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 18-22
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 3941字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2010.02.004

摘要

本研究从鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus,SVCV)SVCV-741毒株克隆鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因(svc-g),将svc-g亚克隆到原核表达栽体pET-28a,转化大肠杆菌E.coli BL-21(DE3)后,用IPTG诱导培养,获得茵体总蛋白.用SVCV毒株免疫山羊所得到的抗血清作为一抗进行免疫印迹实验,结果在硝酸纤维素滤膜上检测到50～71 kDa之间的特异性免疫条带,与SVCV糖蛋白预测分子量一致,研究证明了工程茵表达获得的重组蛋白具有与SVCV毒株相同的免疫原性,也证明了该蛋白的糖基化对其免疫表位是非必需的.本研究进一步通过发酵基因工程茵和蛋白质纯化过程,获得大量的鲤春病毒血症病毒糖蛋白,为后期免疫动物获得抗血清储备了原料,也为SVCV的免疫学检测方法的建立奠定了物质基础.