鲤春病毒血症病毒糖蛋白在杆状病毒表达系统中的表达与鉴定

• 作者: 于力 何俊强 兰文升 刘红 史秀杰 叶奕优 王津津 贾鹏 郑晓聪
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 鲤春病毒血症病毒 糖蛋白 杆状病毒表达
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 74-78
• 页数: 5页
• 分类号: S941.416|Q786
• 字数: 4114字
• 语种: 中文

摘要

本实验利用杆状病毒表达系统表达鲤春病毒血症病毒(SVCV)糖蛋白.将SVCV糖蛋白基因(G)插入到供体质粒pFastBacHTA中,再用构建的质粒pFastBac-G转化E.coli DH10 α Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选,获得含G基因的重组穿梭载体Bacmid-G.通过脂质体介导将Bacmid-G转染对数生长期的Sf9细胞,获得重组杆状病毒AcNPV-G.AcNPV-G感染Sf9细胞,超声破碎后离心取上清进行SDS-PAGE及Western Blot试验,结果可见大小约为57 kDa的蛋白条带,并与羊抗SVCV血清发生特异性反应.间接免疫荧光试验在感染AcNPV-G的Sf9细胞中观察到荧光信号.试验结果表明,AcNPV-G在Sf9细胞中成功的表达了SVCV糖蛋白,且具有良好的免疫学活性.