慢性HBV感染者外周血单个核细胞中miR-194-5p和MagT1表达水平检测及其意义

• 作者: 刘洋 吴景华 李广平 林晓娥 祝朝前 谌晓楠 黎洁
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 外周血单个核细胞 miR-194-5p 镁离子转运蛋白1
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 607-613
• 页数: 7页
• 分类号: R512.62
• 字数: 4758字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200328

摘要

目的:检测慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中miR-194-5p和镁离子(Mg2+)转运蛋白1 (MagT1)表达水平,阐明其可能的临床意义.方法:收集40例健康体检者(健康对照组)、40例HBV携带者(HBV携带组)、40例轻中度慢性乙型肝炎(轻中度CHB组)和40例重度慢性乙型肝炎(重度CHB组)患者的临床资料.采集各组研究对象外周血并利用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离PBMCs,采用RT-PCR法检测各组研究对象PBMCs中miR-194-5p及MagT1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组研究对象PBMCs中MagT1蛋白表达水平,检测各组研究对象外周血和PBMCs中Mg+水平,流式细胞术检测各组研究对象PBMCs中CD8+T淋巴细胞表面分子程序性死亡受体1(PD-1)和自然杀伤细胞受体2群D分子(NKG2D)表达水平.在293T细胞中分别转染miR-194-5p mimic质粒(miR-194-5p mimic 组)和miR-NC质粒(miR-NC组),应用双荧光素酶报告基因实验检测2组293T细胞中荧光素酶活性.结果:与健康对照组比较,HBV携带组、轻中度CHB组和重度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg2+水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平均明显降低(P＜0.05),miR-194-5pmRNA及CD8+T淋巴细胞表面分子PD-1表达水平升高(P＜0.05).与HBV携带组和轻中度CHB组比较,重度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg2+水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平均降低(P＜0.05),miR-194 5p mRNA及CD8+T细胞表面分子PD-1表达水平降低(P＜0.05).与HBV携带组比较,轻中度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg2+水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平降低(P＜0.05),miR-194-5p mRNA及CD8+T淋巴细胞表面分子PD-1表达水平升高(P＜0.05).双荧光素酶报告基因实验,MagT1是miR-194-5p靶基因.结论:miR-194-5p可能通过靶向下调MagT1表达,引起MagT1介导的Mg2+内流障碍,造成CD8+T淋巴细胞免疫活性降低,导致乙型肝炎慢性发展.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黎洁	河北省唐山市工人医院检验科	6	26	3.0	5.0
2	刘洋	河北省唐山市工人医院肝胆外科	33	49	4.0	6.0
3	吴景华	华北理工大学附属医院检验科	17	55	5.0	6.0
4	林晓娥	河北省唐山市工人医院检验科	5	47	3.0	5.0
5	李广平	河北省唐山市工人医院检验科	5	10	2.0	3.0
6	谌晓楠	河北省唐山市工人医院肝胆外科	1	0	0.0	0.0
7	祝朝前	河北省唐山市工人医院肝胆外科	1	0	0.0	0.0