兔抗人MiR-338抗体制备与鉴定

• 作者: 吴大英 张秀艳 李霞 郭予武
• 来源期刊: 九江学院学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢癌 MiR-338 抗体 制备
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 医学
• 页码范围: 96-99
• 页数: 4页
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文
• DOI: 10.19717/j.cnki.jjun.2020.02.023

摘要

目的 制备兔抗人MiR-338分子多克隆抗体.方法 PCR法扩增出MiR-338基因,将其克隆入原核表达裁体pET28中,转化大肠杆菌BL21 (DE3)、IPTG诱导重组蛋白的表达,Ni2+-NTA Agarose亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫家兔,制备多克隆抗体,并用ELISA、Western blot和免疫组织化学法检测抗体.结果 成功构建了MiR-338原核表达载体pET28/MiR-338,高效表达并纯化MiR-338蛋白,间接ELISA检测所制备抗体的效价为1∶6400,Western blot显示该抗体能与MiR-338特异结合,免疫组织化学法检测结果表明该抗体识别人卵巢癌组织中的天然的MiR-338.结论 成功地制备了效价高、特异性较强兔抗人MiR-338抗体,为进一步建立MiR-338的ELISA检测方法和探讨MiR-338在卵巢癌的发生发展中所起的重要作用奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴大英		1	0	0.0	0.0
2	张秀艳		1	0	0.0	0.0
3	李霞		1	0	0.0	0.0
4	郭予武		1	0	0.0	0.0