幽门螺杆菌空泡毒素VacA促进胃上皮细胞NLRP3炎性小体激活

• 作者: 兰春慧 左钱飞 张意 朱建儒 王廷义 赵喆 赵靖涛
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 VacA 炎性小体 NLRP3 IL-1β
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 临床免疫学
• 页码范围: 58-63,68
• 页数: 7页
• 分类号: R573.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20200011

摘要

目的 探究H.pylori空泡毒素VacA对胃上皮细胞NLRP3炎性小体激活的影响.方法 采用WT H.pylori26695和△VacA H.pylori26695感染AGS细胞,Western blotting、qRT-PCR、ELISA检测NLRP3、Pro-Caspase-1、Caspase-1、pro-IL-1β和IL-1β的表达.siRNA-NC、siRNA-NLRP3转染AGS后,分别用PBS、WT H.pylori26695和△VacA H.pylori26695刺激,qRT-PCR和细胞因子ELISA检测试剂盒分别检测pro-IL-1β的mRNA表达水平和IL-1β的蛋白表达水平.收集慢性胃炎患者标本,鉴别出H.pylori阳性患者的VacA基因型(s1m1型和s1m2型),通过qRT-PCR检测NLRP3、caspase-1、pro-IL-1β的mRNA表达水平及采用细胞因子ELISA试剂盒检测IL-1β蛋白表达水平.C57BL/6小鼠腹腔注射DMSO或者DMSO+Mcc950,H.pylori菌液灌胃,qRT-PCR和ELISA检测胃组织IL-1β的表达.结果 H.pylori感染AGS细胞,与对照组相比,WT H.pylori26695组IL-1β的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P＜0.01);△VacA H.pylori26695组与WT H.pylori26695组相比,IL-1β的mRNA和蛋白表达水平均明显下降(P＜0.01).与siRNA-NC组相比,采用WT H.pylori26695和△VacA H.pyloi 26695刺激转染siRNA-NLRP3的AGS细胞pro-IL-1β的mRNA水平和IL-1β蛋白表达水平均明显下调(P＜0.01).H.pylori阳性患者较阴性患者NLRP3、Caspase-1和IL-1β的mRNA表达水平明显升高(P＜0.01);与VacA s1m2型患者相比,VacA s1m1型患者NLRP3、Caspase-1和IL-1β的mRNA表达水平显著升高(P＜0.01),同时IL-1β成熟分泌增加.H.pylori慢性胃炎小鼠动物模型中,与对照组相比,Mcc950组中在WT H.pylori26695和△VacA H.pylori26695灌胃后,pro-IL-1β的mRNA水平和IL-1β蛋白水平表达均明显下调(P＜0.01).结论 H.pfori空泡毒素VacA能够激活胃上皮细胞NLRP3炎性小体,促进IL-1β的成熟分泌.