芪玉三龙汤调节Beclin1,Atg5,LC3B表达以抑制肺癌肿瘤生长机制

• 作者: 张星星 朱洁 李泽庚 程建超 童佳兵 郑莉莉 陈杨 高雅婷
• 来源期刊: 中国实验方剂学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 芪玉三龙汤 肺癌 自噬 自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1) 自噬相关基因5(Atg5) 微管相关蛋白1轻链3 (LC3B)
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 29-35
• 页数: 7页
• 分类号: R22|R242|R2-031|R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200621

摘要

目的:研究芪玉三龙汤对肺癌小鼠皮下移植瘤生长及对自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1),自噬相关基因5(autophagy related genes,Atg5)及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein1 light chain3,LC3B)表达的影响.方法:采用Lewis肺癌细胞(lewis lung cancer cell,LLC)构建肺癌移植瘤小鼠模型,造模成功后随机分为模型组、芪玉三龙汤组、顺铂组及联合组,每组18只移植瘤小鼠.模型组每日按照生理盐水20 mL·kg-1灌胃;芪玉三龙汤组每日按照80.48 g·kg-灌胃;顺铂组在第1,3,5天腹腔注射顺铂溶液(DDP)0.4 mL;联合组每日按80.48 g·kg-灌胃给药,并分别在第1,3,5天腹腔注射顺铂溶液0.4 mL;连续治疗21 d剥离瘤组织,称取瘤重,计算抑瘤率.苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤组织形态学改变.免疫组化检测肿瘤组织中Beclin1,LC3B蛋白表达和定位.蛋白免疫印迹法(Western blot)测定Beclin1,Atg5,微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3B-Ⅰ)及微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)蛋白表达,并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ.实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织Beclin1,Atg5 mRNA转录水平.结果:芪玉三龙汤具有温和的移植瘤抑制作用,抑瘤率为31.2％;镜下观察芪玉三龙汤组肿瘤组织可见片状坏死的肿瘤细胞;免疫组化及Western blot实验表明,与模型组比较,芪玉三龙汤能够上调Beclin1,Atg5,LC3B蛋白的表达(P＜0.01),并且能促进LC3B-Ⅰ转化为LC3B-Ⅱ;Real-time PCR结果表明,与模型组比较,芪玉三龙汤能够促进Beclin1,Atg5 mRNA的转录(P＜0.01).结论:芪玉三龙汤对肺肿瘤生长具有温和地抑制作用,其作用机制可能与上调自噬关键分子Beclin1,Atg5,LC3B表达,促进LC3B-Ⅰ向LC3B-Ⅱ转化有关.