丁香假单胞菌发酵液中的冠菌素含量测定方法及其应用

• 作者: 于春欣 刘少金 李召虎 段留生 谭伟明
• 来源期刊: 农药学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 丁香假单胞菌发酵液 冠素菌 含量分析 分散液-液微萃取 高效液相色谱法
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 561-566
• 页数: 6页
• 分类号: S482.8
• 语种: 中文
• DOI: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0022

摘要

为了辅助提高工程菌种改良的效率,建立了一种简单、快速、高效的分散液-液微萃取-高效液相色谱检测丁香假单胞菌发酵液中冠菌素的分析方法.优化了蛋白沉淀法、萃取剂的种类和体积、分散剂的种类和体积、萃取时间和离心强度等对萃取率的影响.确定最优萃取条件为:以2.0 mL丙酮作为分散剂,以400μL氯苯为萃取剂,萃取5 min,在5000 r/min下离心5 min.高效液相色谱的检测条件为:流动相为V(甲醇):V(0.5％ 乙酸水溶液)=70:30,等梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长220 nm.在3.2～100 mg/L范围内,冠菌素的峰面积与其质量浓度间呈良好的线性关系,相关系数(r)为0.9998.方法的检出限为2.1 mg/L,定量限为6.5 mg/L.在6.5、25和100 mg/L添加水平下,冠菌素在丁香假单胞菌发酵液中的回收率在95％～98％ 之间,相对标准偏差(n=5)在2.7％～5.1％ 之间.该方法可用于丁香假单胞菌发酵液中冠菌素含量的测定.