杂交鹅掌楸LhFB1基因启动子的克隆及活性分析

• 作者: 余发新 刘立盘 李彦强 杨爱红 钟永达
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 杂交鹅掌楸 pLhFB1启动子 转基因拟南芥 GUS染色
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 林业科学
• 页码范围: 52-61
• 页数: 10页
• 分类号: S792.21
• 字数: 5813字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13207/j.cnki.jnwafu.2020.06.006

摘要

[目的]研究杂交鹅掌楸LhFB1基因启动子(pLhFB1)的活性,为研究该基因功能及相关机制提供参考.[方法]利用染色体步移法(Genome Walking)克隆LhFB1基因上游5'侧翼调控区序列,利用生物信息学软件PlantCARE分析其包含的顺式作用调控元件.构建pCAMBIA1300-pLhFB1重组载体,对本氏烟草幼苗期叶片进行瞬转注射和GUS染色表达.花序浸染法将重组载体转化至野生型拟南芥,GUS组织染色分析其在T2代转基因植株开花期根、茎、叶和花组织中的表达量,并用qRT-PCR对GUS组织染色进行活性验证.[结果]pLhFB1启动子序列长1 780 bp,含有多个TATA-box和CAAT-box及压力响应、激素响应、光信号转导、代谢循环元件.瞬转结果表明,烟草叶片注射部位有蓝色斑点,说明启动子有活性.遗传转化结果表明,转pLhFB1启动子拟南芥根、茎、叶和花组织中都有不同程度的蓝色,且根和茎中的蓝色斑块较深.qRT-PCR结果说明,pLhFB1启动子在拟南芥根、茎、叶和花组织都有表达,与GUS染色结果基本相符.[结论]克隆得到pLhFB1启动子序列,其在转拟南芥植株各组织中都有活性,但以根和茎中较强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余发新	江西省科学院生物资源研究所江西省观赏植物遗传改良重点实验室	62	527	10.0	20.0
2	李彦强	江西省科学院生物资源研究所江西省观赏植物遗传改良重点实验室	15	50	5.0	6.0
3	刘立盘	江西省科学院生物资源研究所江西省观赏植物遗传改良重点实验室	3	7	1.0	2.0
4	钟永达	江西省科学院生物资源研究所江西省观赏植物遗传改良重点实验室	9	30	3.0	5.0
5	杨爱红	江西省科学院生物资源研究所江西省观赏植物遗传改良重点实验室	4	1	1.0	1.0