MDR1启动子的克隆及其转录活性的检测

• 作者: 吴嫦丽 张秀娟 赵聪聪 闫吕彬 陈春玲
• 来源期刊: 广东医科大学学报
• 关键词: 多药耐药基因1 启动子 克隆 转录
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 250-253
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4057.2016.03.008

摘要

目的 克隆人多药耐药基因1 (MDR1)5'非编码区启动子序列,并检测该段启动子在人肝癌细胞株HepG2中的转录活性.方法 提取HepG2肝癌细胞基因组DNA,PCR扩增人MDR1启动子序列(-1 040～ +288);采用基因重组技术构建由MDR1启动子驱动的荧光素酶报告基因载体,将该载体瞬时转染HepG2细胞,通过双荧光素酶报告基因试剂盒检测该MDR1启动子在HepG2细胞的转录活性.结果 PCR扩增出人MDR1启动子(-1 040～ +288)片段,PCR鉴定、酶切鉴定及测序鉴定均证实该段启动子驱动的荧光素酶报告基因载体构建正确;转染实验证实,转染该质粒的HepG2细胞中荧光素酶活性很高.结论 成功克隆了人MDR1启动子(-1 040～ +288),并证实该MDR1启动子具有较强的转录活性.该启动子的成功克隆为后续研究MDR1基因在药物耐药中作用和基因表达调控机制提供了载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴嫦丽	广东医科大学生理学教研室	6	3	1.0	1.0
2	陈春玲	广东医科大学生理学教研室	6	3	1.0	1.0
3	张秀娟	广东医科大学生理学教研室	8	6	2.0	2.0
4	赵聪聪	广东医科大学生理学教研室	2	0	0.0	0.0