摘要:
[目的]本研究克隆亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg)基因,分析其表达模式,旨在探究UV-A胁迫对亚洲玉米螟Vg基因表达及生殖力的影响.[方法]采用RT-PCR和RACE技术克隆亚洲玉米螟Vg基因的全长,并用生物信息学方法分析其特征;利用RT-qPCR检测亚洲玉米螟不同发育阶段(卵、1-5龄幼虫、蛹和成虫)、雌成虫不同组织(头、足、表皮、卵巢、中肠和脂肪体)中和雌成虫在UV-A胁迫不同时间(0,0.5,1,1.5,2,2.5,3,3.5和4h)下该基因的相对表达量.测定UV-A照射不同时长(0,1,2,3和4 h/d)后亚洲玉米螟成虫的生殖及F1代发育情况.[结果]克隆获得亚洲玉米螟Vg基因的序列,命名为OfVg(GenBank登录号:MK782978).该基因全长5 760 bp,开放阅读框(ORF)长5 331 bp,编码1 776个氨基酸,蛋白相对分子量为202.10 kD,等电点为9.06.Of Vg包含Vg-N,DUF 1943D和VWD 3个功能结构域,无跨膜区结构.系统发育分析表明,Of Vg与鳞翅目其他昆虫的Vg的亲缘关系最近.发育表达谱表明,OfVg基因在雌成虫中表达量显著高于其他龄期的表达量,且在雌虫羽化24 h时OfVg表达量最高;组织表达谱表明,OfVg基因在雌成虫脂肪体中特异表达.UV-A照射能诱导雌成虫OfVg的表达,随着照射时间的延长,其表达量先下降再快速上升,在照射3.5h时其表达量最高,然后骤降;UV-A处理1,2和3 h/d雌成虫的产卵量显著增加,且F1代幼虫发育历期显著延长.[结论]OfVg基因在亚洲玉米螟不同发育阶段、雌成虫不同组织中和UV-A照射不同时间的雌成虫中差异表达.本研究为深入研究UV-A胁迫对亚洲玉米螟发育和繁殖的影响奠定了基础.