含RGD修饰的病毒样颗粒递送ICG靶向肿瘤的研究

• 作者: 张怡青 李玉林 王云龙 蒋丹丹
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: RGD-HBc VLPs 表达纯化 靶向性 近红外荧光活体成像
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 22-29
• 页数: 8页
• 分类号: Q819
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.2001065

摘要

目的:获取含RGD靶向肽的乙肝核心病毒样颗粒,为药物靶向纳米递送系统提供一种新型载体.方法:将实验室前期构建测序正确的含RGD修饰的乙肝核心病毒重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,单因素分析及正交试验探究重组蛋白最适表达条件.在最适表达条件下扩培,收集菌体超声破碎后离心,采用凝胶过滤层析、离子交换和蔗糖密度梯度离心进行纯化,利用透射电镜对形成的RGD-HBc VLPs的形态及稳定性进行鉴定.纯化的RGD-HBc VLPs利用其体外自组装的特性,将光敏剂ICG装载到颗粒的内部,通过静脉注射到4T1乳腺癌荷瘤小鼠,探究重组RGD-HBc VLPs作为纳米递送系统的靶向性.结果:RGD-HBc VLPs在温度32℃、IPTG0.5mmol/L、诱导4h时以可溶性蛋白的形式得到高效表达.经蔗糖密度梯度离心纯化后纯度到达95％以上.透射电镜下观察纯化的RGD-HBc VLPs形态、大小均一,直径约为32nm,通过近红外荧光活体成像证实了RGD-HBc作为纳米载体的靶向性.结论:经表达和纯化后,RGD-HBc VLPs具有较高的表达量和大小均一的形态外貌,近红外荧光活体成像证实具有较好的靶向性,这不仅为肿瘤的可视化诊断提供一种快速、精准、方便的方法,而且为今后靶向免疫治疗提供一种新型载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王云龙		47	252	9.0	13.0
2	李玉林		35	123	7.0	9.0
3	蒋丹丹	河南师范大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
4	张怡青		1	0	0.0	0.0