牦牛CAV1基因克隆及其在雌性生殖系统主要器官中的表达定位

• 作者: 余四九 崔燕 张瑞 潘阳阳 王靖雷 王静瑜 胡学权 马睿
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牦牛 窖蛋白-1(CAV1) 胞吞
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 681-692
• 页数: 12页
• 分类号: S823.8+5.2
• 字数: 8104字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2020.04.010

摘要

窖蛋白-1(Caveolin-1,CAV1)是一种与内吞作用、细胞外基质组织、胆固醇分布、细胞迁移和信号传导相关的膜蛋白.为探索正常生理条件下CAV1在雌性牦牛(Bos grunniens)生殖系统中的表达及其生理功能,本研究以牦牛不同繁殖时期(卵泡期,黄体期和妊娠期)的子宫、卵巢和输卵管为材料,利用基因克隆、qRT-PCR、蛋白质免疫印迹(Western blot)、免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)等方法,对CAV1基因和蛋白的表达进行分析.结果显示,CAV1基因(GenBank No.MN127963)高度保守,牦牛CAVI基因序列与普通牛(Bos taurus)相比有差异,但其编码的氨基酸不变,牦牛CAVI基因与普通牛和绵羊(Ovis aries)亲缘性最近,与家猫(Felis catus)和家犬(Canis lupus familiaris)亲缘性最远,其编码的蛋白为稳定的疏水性膜蛋白;CAV1在雌性牦牛生殖系统主要器官中均有表达,其中卵泡期输卵管、卵巢、子宫中CAV1的表达水平显著高于黄体期、妊娠期(P<0.05),妊娠期输卵管中CAV1的表达水平显著高于黄体期(P<0.05),黄体期卵巢和子宫中CAV1的表达水平显著高于妊娠期(P<0.05);免疫组织化学结果显示,CAV1在输卵管黏膜上皮、浆液腺,卵巢卵泡膜、卵泡颗粒层、生殖上皮、黄体细胞,子宫内膜和子宫腺体均有表达.研究结果为深入探索CAV1参与哺乳动物生殖生理调控提供了理论基础,有助于高原哺乳动物繁殖规律的研究.