肝细胞特异性HuR基因敲除小鼠模型的表型研究

• 作者: 吴燚阳 季晓克 张启瑜 戴克智 李义孟 黄思琪 黄政伟 黄文铅
• 来源期刊: 肝胆胰外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞特异性 基因敲除 人抗原R(HuR) 肝功能不全 小鼠模型
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 488-493
• 页数: 6页
• 分类号: R657
• 字数: 3751字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11952/j.issn.1007-1954.2020.08.009

摘要

目的 探讨肝细胞特异性敲除HuR基因对小鼠肝脏功能的影响.方法 从美国Jackson实验室引进LoxP标记的人抗原R(human antigen R,HuR)基因小鼠(HuRfl/fl)和Alb-Cre转基因小鼠.杂交后,经数代选育配种,建立肝细胞特异性HuR基因敲除小鼠(HuRLKO)模型.PCR技术鉴别小鼠基因型,蛋白免疫印迹和免疫荧光实验检验小鼠肝脏的HuR表达水平,同时HE染色观察肝脏结构变化.高脂喂养HuRfl/fl/Alb-Cre和HuRfl/fl两组小鼠,观察小鼠体重、肝重和肝体比变化,提取血清检测肝脏损伤和脂肪代谢相关指标.结果 PCR成功检测筛选子代小鼠基因型,包括HuRfl/fl/Alb-Cre和HuRfl/fl小鼠.蛋白免疫印迹实验和免疫荧光实验证明小鼠肝细胞特异性HuR基因敲除成功.HE染色结果提示HuRLKO小鼠的肝细胞出现变性水肿、局部坏死.高脂喂养实验提示两组小鼠在肝重、肝体比、AST、ALT、HDL-C、血糖上的差异具有统计学意义(P<0.05),但在体重、TG、LDL-C的差异没有统计学意义(P>0.05).结论 HuR基因是维持小鼠肝细胞功能的必要基因,Cre-LoxP技术可成功构建HuRLKO小鼠模型,且特异性高,表型明显,为研究HuR在肝脏各项疾病的发生发展中所扮演的角色,提供了一个很好的疾病模型.