摘要:
目的 探讨腹腔与尾静脉注射N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)两种给药途径对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)组织病理学、活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达及细胞凋亡的影响.方法 健康无眼疾成年Spra-gue-Dawley雄性大鼠54只,采用随机数字表法分为正常对照组(n=6)、RIRI腹腔组(n=12)、RIRI静脉组(n=12)、NAS腹腔组(n=12)和NAS静脉组(n=12),后四组采用升高眼压法建立大鼠RIRI模型.NAS腹腔组、NAS静脉组于建模前30 min分别经腹腔、尾静脉注射NAS(10 mg·kg-1),RIRI腹腔组、RIRI静脉组于造模前30 min分别经腹腔、尾静脉注射同等剂量的生理盐水.RIRI后24 h,采用免疫组织化学染色检测各组大鼠视网膜中活性Caspase-3的表达,TUNEL染色检测各组视网膜细胞凋亡情况;RIRI后7 d,HE染色观察各组视网膜组织病理学变化.结果 HE染色结果示,正常对照组大鼠视网膜各层细胞排列整齐、规则;RIRI后7 d,RIRI腹腔组与RIRI静脉组大鼠视网膜细胞排列稀疏、紊乱,形态不规则,视网膜内层厚度变薄;NAS腹腔组视网膜细胞形态较规则,排列较规整;NAS静脉组视网膜各层形态及细胞排列均趋于正常.NAS静脉组视网膜内层厚度[(91.67±1.43)μm]显著高于NAS腹腔组[(87.80±1.33)μm]、RIRI腹腔组[(82.37±1.09)μm]和RIRI静脉组[(82.81±0.90)μm],差异均具有统计学意义(均为P<0.05);且NAS静脉组视网膜神经节细胞数[(616.90±79.51)个·mm-2]显著高于NAS腹腔组[(529.25±92.05)个·mm-2]、RIRI静脉组[(434.42±87.17)个·mm-2]、RIRI腹腔组[(390.72±72.12)个·mm-2],差异均具有统计学意义(均为P<0.05).免疫组织化学染色结果发现,RIRI后24 h,NAS静脉组活性Caspase-3阳性细胞数[(145.01±22.54)个·mm-2]少于NAS腹腔组[(221.34±30.84)个·mm-2],差异具有统计学意义(P<0.05),二者活性Caspase-3阳性细胞数均显著少于RIRI静脉组[(380.54±41.25)个·mm-2]和RIRI腹腔组[(387.79±26.72)个·mm-2],差异均具有统计学意义(均为P<0.05).TUNEL染色结果示,RIRI后24 h,NAS静脉组TUNEL染色阳性细胞数[(1468.03±128.40)个·mm-2]少于NAS腹腔组[(1968.96±254.98)个·mm-2],差异具有统计学意义(P<0.05),二者TUNEL染色阳性细胞数均显著少于RIRI静脉组[(2122.77±165.76)个·mm-2]和RIRI腹腔组[(2140.53±177.96)个·mm-2],差异均具有统计学意义(均为P<0.05).结论 腹腔及静脉注射NAS治疗均可减少视网膜细胞凋亡,从而减轻RIRI大鼠视网膜损伤,且静脉注射给药的疗效优于腹腔给药.