MGMT基因沉默增强黑色素瘤细胞对替莫唑胺敏感性的研究

• 作者: 任冰洁 李强 梁容瑞 胡颖熹 赵晶 陶敏
• 来源期刊: 临床肿瘤学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黑色素瘤 O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶 替莫唑胺 化疗增敏 DNA损伤
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1057-1063
• 页数: 7页
• 分类号: R739.5
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因沉默对人黑色素瘤细胞替莫唑胺(TMZ)敏感性的影响.方法 将前期构建的靶向MGMT基因特异性短发夹型RNA(shRNA)干扰载体转染人黑色素瘤A375细胞.根据转染质粒的不同及是否加药分组如下:对照组、TMZ组、阴性对照(NC)组、NC-TMZ组、MGMT干扰(MGMTi)组和MGMTi-TMZ(MGMT干扰联合TMZ)组.通过实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blotting和免疫荧光验证质粒载体的干扰效率,MTT法和流式细胞术检测TMZ处理24、48和72 h后A375细胞的增殖和凋亡情况.Western blotting和免疫荧光检测ATR、ATM和γ-H2AX水平以评价细胞DNA的损伤程度.结果 转染MGMT shRNA干扰载体后,MGMTi组MGMT在mRNA和蛋白水平与对照组相比降低(P<0.05).MTT、流式细胞仪、Western blotting和免疫荧光检测结果显示,MGMTi-TMZ组的细胞抑制率、凋亡率及ATR、ATM和γ-H2AX水平较其他组明显升高(P<0.05).结论 沉默MGMT基因的表达能够增强TMZ对A375细胞增殖的抑制作用并促进细胞凋亡,同时增强DNA损伤作用.通过沉默MGMT基因可以提高人黑色素瘤A375细胞对TMZ的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶敏		106	467	12.0	16.0
2	梁容瑞		10	25	3.0	4.0
3	胡颖熹		2	0	0.0	0.0
4	李强		21	58	5.0	6.0
5	赵晶		5	9	1.0	3.0
6	任冰洁		1	0	0.0	0.0