利用高效的大片段DNA回收方法改良Fosmid文库的构建

• 作者: 常玉晓 张翠翠 张鹏 王越 赵胜
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: Fosmid文库 大片段DNA回收 透析袋
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 220-227
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0935

摘要

外源DNA插入片段为40 kb左右的Fosmid文库在基因组学研究中有广泛的应用,但长期以来,40 kb外源片段的分离与纯化依赖于传统的切胶并电洗脱至透析袋的方法,难以得到足够量的DNA片段,极大降低Fosmid文库构建的成功率.通过改进全自动核酸/蛋白质回收系统SageELF的操作流程,建立一种简单、便捷、高效地回收40 kb左右DNA片段的方法,并用其成功地构建高质量的Fosmid文库.从文库中随机挑选的25个单克隆,经过测序及酶切分析,发现该文库中插入的DNA片段大小为37.9±5.2 kb.以上结果表明,利用改良的操作方法回收40 kb基因组DNA,操作简捷、高效,片段大小精准;另外,用该DNA片段构建的Fosmid文库,插入片段比较集中,有利于后续的基因组学分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张鹏	广西大学生命科学与技术学院	30	195	9.0	12.0
3	赵胜	中国农业科学院深圳农业基因组研究所	4	2	1.0	1.0
4	王越	广西大学生命科学与技术学院	6	5	1.0	1.0
10	张翠翠	广西大学生命科学与技术学院	1	0	0.0	0.0
11	常玉晓	中国农业科学院深圳农业基因组研究所	1	0	0.0	0.0